Extraction and purification of total RNA from banana tissues (small scale)

Introduction. Le protocole vise à préparer de l'ARN total pour l'étude de l'expression de gènes par les techniques de Northern Blots, de Reverse Transcription PCR, et de PCR quantitative en temps réel ; pour l'isolement de cDNA par Reverse Transcription PCR ; pour la construction de bibliothèque de cDNA. Le principe, les principaux avantages, le matériel végétal requis, le temps nécessaire à l'obtention de l'ARN total et les résultats escomptés sont présentés. Matériel et méthodes. Cette partie décrit le matériel et les 27 étapes nécessaires pour préparer l'ARN à partir de tissus de peau et de pulpe de banane : préparation de la poudre de tissus végétaux, préparation du tampon d'extraction de l'ARN total, isolement de l'ARN à partir du tissu de banane broyé. Résultats. L'extraction de l'ARN total par la méthode décrite permet de réaliser son électrophorèse avec un gel à base de formaldéhyde comme dénaturant et sa transcription réverse in vitro. Un exemple d'application de Northern Blots est donné.

Bibliographic Details

Main Authors:	Mbéguié-A-Mbéguié, Didier, Fils-Lycaon, Bernard, Chillet, Marc, Hubert, Olivier, Galas, Colette, Gomez, Rose-Marie
Format:	article biblioteca
Language:	eng
Published:	ISHS
Subjects:	F30 - Génétique et amélioration des plantes, banane, Musa, arn, purification, extraction, pulpe de fruits, tissu végétal, PCR, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_806, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_4993, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_6618, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_6377, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_36910, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3126, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_27990, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_34079,
Online Access:	http://agritrop.cirad.fr/545747/ http://agritrop.cirad.fr/545747/1/document_545747.pdf
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!