GENOTIPAGEM DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS ISOLADOS DE LEITÕES DIARRÉICOS
RESUMO Clostridium perfringens é o agente responsável pela enterite necrótica em leitões, caracterizada por diarréia, perda de peso e morte. O presente estudo objetivou a tipificação de C. perfringens a partir de fezes de leitões diarréicos pela técnica da PCR multiplex, utilizando iniciadores específicos para os genes das toxinas alfa (cpa), beta (cpb), beta-2 (cpb-2), épsilon (etx), iota (ia) e enterotoxina (cpe). Foram utilizadas 65 amostras fecais de leitões com idade variando entre sete a 36 dias. O material foi semeado em ágar gema de ovo com cicloserina. Colônias sugestivas de C. perfringens foram submetidas à coloração pelo método de Gram e caracterização bioquímica. Após certificado o crescimento e pureza, os clostrídios foram subcultivados em ágar sangue. Os extratos de DNA para amplificação da PCR foram obtidos por lise direta de uma colônia isolada, não sendo realizada a purificação do DNA. Bacilos anaeróbicos Gram-positivos foram isolados de 59 das 65 amostras fecais testadas. Vinte e sete foram identificadas como C. perfringens e tipificadas, sendo 21 (77,8%) do tipo A, cinco destas apresentavam o gene cpb-2; cinco (18,5%) eram do tipo C, quatro destas apresentavam o gene cpb-2; uma amostra (3,7%) era do tipo D e nenhuma foi positiva para o gene iA ou cpe. Neste estudo Clostridium perfringens tipo A foi o mais prevalente em fezes de leitões diarréicos.
| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | Digital revista |
| Language: | Portuguese |
| Published: |
Instituto Biológico
2008
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| Online Access: | http://old.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1808-16572008000400513 |
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| Summary: | RESUMO Clostridium perfringens é o agente responsável pela enterite necrótica em leitões, caracterizada por diarréia, perda de peso e morte. O presente estudo objetivou a tipificação de C. perfringens a partir de fezes de leitões diarréicos pela técnica da PCR multiplex, utilizando iniciadores específicos para os genes das toxinas alfa (cpa), beta (cpb), beta-2 (cpb-2), épsilon (etx), iota (ia) e enterotoxina (cpe). Foram utilizadas 65 amostras fecais de leitões com idade variando entre sete a 36 dias. O material foi semeado em ágar gema de ovo com cicloserina. Colônias sugestivas de C. perfringens foram submetidas à coloração pelo método de Gram e caracterização bioquímica. Após certificado o crescimento e pureza, os clostrídios foram subcultivados em ágar sangue. Os extratos de DNA para amplificação da PCR foram obtidos por lise direta de uma colônia isolada, não sendo realizada a purificação do DNA. Bacilos anaeróbicos Gram-positivos foram isolados de 59 das 65 amostras fecais testadas. Vinte e sete foram identificadas como C. perfringens e tipificadas, sendo 21 (77,8%) do tipo A, cinco destas apresentavam o gene cpb-2; cinco (18,5%) eram do tipo C, quatro destas apresentavam o gene cpb-2; uma amostra (3,7%) era do tipo D e nenhuma foi positiva para o gene iA ou cpe. Neste estudo Clostridium perfringens tipo A foi o mais prevalente em fezes de leitões diarréicos. |
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