Ontwikkelen van detectiemethoden voor virussen in bloembolgewassen
Doel van dit project was, om detectiemethoden te ontwikkelen om virussen (en fytoplasma’s) in bloembolgewassen specifiek, snel en gevoelig aan te tonen. De resultaten van dit project zorgden voor betere toetsingsmogelijkheden. Keuringsactiviteiten van de Bloembollenkeuringsdienst (BKD) worden ondersteund met laboratoriumtoetsen op grotere of kleinere schaal. De toetsingen op grotere schaal vinden plaats met ELISA, waarvoor antisera nodig zijn. Voor de virussen die specifiek in bloembolgewassen voorkomen, zijn deze antisera bij het voormalige LBO, nu PPO-bloembollen, gemaakt. Voor toetsingen op kleinere schaal worden PCR toetsen steeds meer ingezet, bijvoorbeeld omdat (nog) geen geschikte antisera beschikbaar zijn. Voor tulpenvirus X (TVX) is een specifiek antiserum gemaakt en getest; zuivering van antigenen en antiserumbereiding voor TVX zijn uitgevoerd. Een kwalitatief goed serum (zowel specifiek als een hoge gevoeligheid) is opgeleverd en beschikbaar voor het bloembollenvak. Dit maakt dat de afhankelijkheid voor externe leverantie van dit serum tot het verleden behoort. Dit antiserum is uitgeleverd aan de BKD. Voor dahliamozaiekvirus (DMV) zijn voor PCR-detectie specifieke primers gemaakt en getest. Deze primers zijn uitgeleverd aan de BKD. Er bleken in de praktijk meerdere typen (zg. grote en kleine) Dahliamozaiekvirus (DMV)-isolaten aanwezig. De poging om via een bacterieel expressiesysteem viruseiwitten in overmaat te maken als voorbereiding op aanmaak van antiserum tegen DMV is niet gelukt. In gladiool en hyacint zijn fytoplasma’s (vergelingsheksenbezemziekte) nu goed aantoonbaar met behulp van een PCR toets. Deze toets gaat veel sneller en is gevoeliger dan de voormalige microscopische toets, gebaseerd op fluorescentie. Verder is gewerkt aan het opzetten van een goede detectie voor Augustaziek (Tabaksnecrosevirus: TNV). Groepsspecifieke primers om TNV aan te tonen zijn ontworpen en beschikbaar gesteld aan de BKD. Voor Tulpengrijsvirus (TSMV) zijn, ten behoeve van een goede en betrouwbare toets zg. specifieke primers ontworpen, die geen kruisreactie vertoonden met andere Closterovirussen. Als eindresultaat van dit project kan vastgesteld worden, dat nieuwe toetsingen op belangrijke bloembolvirussen en fytoplasma’s zijn opgeleverd. Dit is van belang voor het bloembollenvak om de kwaliteit van het plantmateriaal te bewaken, daar vooral PCR toetsen ook symptoomloze aantastingen kunnen detecteren.
| Main Authors: | , , , |
|---|---|
| Format: | External research report biblioteca |
| Language: | Dutch |
| Published: |
Praktijkonderzoek Plant & Omgeving
|
| Subjects: | detection, diagnostics, ornamental bulbs, phytoplasma, plant disease control, plant viruses, bloembollen, detectie, diagnostiek, plantenvirussen, plantenziektebestrijding, |
| Online Access: | https://research.wur.nl/en/publications/ontwikkelen-van-detectiemethoden-voor-virussen-in-bloembolgewasse |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Summary: | Doel van dit project was, om detectiemethoden te ontwikkelen om virussen (en fytoplasma’s) in bloembolgewassen specifiek, snel en gevoelig aan te tonen. De resultaten van dit project zorgden voor betere toetsingsmogelijkheden. Keuringsactiviteiten van de Bloembollenkeuringsdienst (BKD) worden ondersteund met laboratoriumtoetsen op grotere of kleinere schaal. De toetsingen op grotere schaal vinden plaats met ELISA, waarvoor antisera nodig zijn. Voor de virussen die specifiek in bloembolgewassen voorkomen, zijn deze antisera bij het voormalige LBO, nu PPO-bloembollen, gemaakt. Voor toetsingen op kleinere schaal worden PCR toetsen steeds meer ingezet, bijvoorbeeld omdat (nog) geen geschikte antisera beschikbaar zijn. Voor tulpenvirus X (TVX) is een specifiek antiserum gemaakt en getest; zuivering van antigenen en antiserumbereiding voor TVX zijn uitgevoerd. Een kwalitatief goed serum (zowel specifiek als een hoge gevoeligheid) is opgeleverd en beschikbaar voor het bloembollenvak. Dit maakt dat de afhankelijkheid voor externe leverantie van dit serum tot het verleden behoort. Dit antiserum is uitgeleverd aan de BKD. Voor dahliamozaiekvirus (DMV) zijn voor PCR-detectie specifieke primers gemaakt en getest. Deze primers zijn uitgeleverd aan de BKD. Er bleken in de praktijk meerdere typen (zg. grote en kleine) Dahliamozaiekvirus (DMV)-isolaten aanwezig. De poging om via een bacterieel expressiesysteem viruseiwitten in overmaat te maken als voorbereiding op aanmaak van antiserum tegen DMV is niet gelukt. In gladiool en hyacint zijn fytoplasma’s (vergelingsheksenbezemziekte) nu goed aantoonbaar met behulp van een PCR toets. Deze toets gaat veel sneller en is gevoeliger dan de voormalige microscopische toets, gebaseerd op fluorescentie. Verder is gewerkt aan het opzetten van een goede detectie voor Augustaziek (Tabaksnecrosevirus: TNV). Groepsspecifieke primers om TNV aan te tonen zijn ontworpen en beschikbaar gesteld aan de BKD. Voor Tulpengrijsvirus (TSMV) zijn, ten behoeve van een goede en betrouwbare toets zg. specifieke primers ontworpen, die geen kruisreactie vertoonden met andere Closterovirussen. Als eindresultaat van dit project kan vastgesteld worden, dat nieuwe toetsingen op belangrijke bloembolvirussen en fytoplasma’s zijn opgeleverd. Dit is van belang voor het bloembollenvak om de kwaliteit van het plantmateriaal te bewaken, daar vooral PCR toetsen ook symptoomloze aantastingen kunnen detecteren. |
|---|