Búsqueda de Biomarcadores para el Diagnóstico y Estadio de la Nefritis Lúpica Mediante la Identificación de Perfiles de miRNA's en Individuos con Lupus Eritematoso Sistémico.
La nefritis lúpica y sus complicaciones constituyen la principal causa de morbilidad y mortalidad en pacientes con lupus eritematoso sistémico. La afección renal constituye un predictor de pobre pronóstico de la enfermedad. En la actualidad existe poca fiabilidad del diagnostico basado únicamente en las características clínicas. Por lo tanto, hacer un diagnóstico sobre bases clínicas por sí solas, es problemático y arriesgado, lo que subraya la necesidad de una biopsia de riñón, la cual presenta diversas complicaciones, siendo la mas común el sangrado. Los microRNA's (miRNA's) se encuentra en varios tejidos con expresión variable, y cambios en su expresión están relacionados con procesos patológicos de diversas enfermedades. Los miRNA's están presentes en diversos fluidos biológicos como la sangre y la orina haciendo de los mismos candidatos potenciales para su uso como biomarcadores diagnósticos. El propósito del presente trabajo es caracterizar los perfiles de expresión de miRNA's en muestras de sangre de pacientes con diferentes tipos de nefritis lúpica. Para ello se tomará una muestra de sangre venosa de pacientes con diferentes tipos de afectación renal previamente diagnosticados por biopsia renal. Se extraerá el ARN total, con el cual se realizará RT-PCR para producir la librería de secuenciación. Los productos serán purificados y secuenciados con tecnología de secuenciación masiva paralela, de próxima generación. Para la identificación de miRNA's previamente descritos se alinearán las secuencias obtenidas por secuenciación con la base de datos miRBase, y se predecirán nuevos miRNA's con Diver Mireap. Las secuencias de miRNA's encontradas sobre-expresadas serán posteriormente validadas por PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR). Esperamos poder identificar diferencias en los patrones de expresión de miRNA's de acuerdo al nivel de afectación renal, lo cual a futuro permitirá hacer un diagnostico diferencial basado en biología molecular.
| Main Author: | |
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| Other Authors: | |
| Format: | Informe de investigación biblioteca |
| Language: | spa |
| Published: |
2020-10-23T00:05:30Z
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| Subjects: | Biomarcadores, Lupus Eritematoso Sistémico, Nefritis Lúpica, Secuenciación masiva, miRNA's, |
| Online Access: | https://colciencias.metadirectorio.org/handle/11146/39117 http://colciencias.metabiblioteca.com.co |
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| Summary: | La nefritis lúpica y sus complicaciones constituyen la principal causa de morbilidad y mortalidad en pacientes con lupus eritematoso sistémico. La afección renal constituye un predictor de pobre pronóstico de la enfermedad. En la actualidad existe poca fiabilidad del diagnostico basado únicamente en las características clínicas. Por lo tanto, hacer un diagnóstico sobre bases clínicas por sí solas, es problemático y arriesgado, lo que subraya la necesidad de una biopsia de riñón, la cual presenta diversas complicaciones, siendo la mas común el sangrado. Los microRNA's (miRNA's) se encuentra en varios tejidos con expresión variable, y cambios en su expresión están relacionados con procesos patológicos de diversas enfermedades. Los miRNA's están presentes en diversos fluidos biológicos como la sangre y la orina haciendo de los mismos candidatos potenciales para su uso como biomarcadores diagnósticos. El propósito del presente trabajo es caracterizar los perfiles de expresión de miRNA's en muestras de sangre de pacientes con diferentes tipos de nefritis lúpica. Para ello se tomará una muestra de sangre venosa de pacientes con diferentes tipos de afectación renal previamente diagnosticados por biopsia renal. Se extraerá el ARN total, con el cual se realizará RT-PCR para producir la librería de secuenciación. Los productos serán purificados y secuenciados con tecnología de secuenciación masiva paralela, de próxima generación. Para la identificación de miRNA's previamente descritos se alinearán las secuencias obtenidas por secuenciación con la base de datos miRBase, y se predecirán nuevos miRNA's con Diver Mireap. Las secuencias de miRNA's encontradas sobre-expresadas serán posteriormente validadas por PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR). Esperamos poder identificar diferencias en los patrones de expresión de miRNA's de acuerdo al nivel de afectación renal, lo cual a futuro permitirá hacer un diagnostico diferencial basado en biología molecular. |
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