Développement de méthodes innovantes de sexage pour l'application de la Technique de l'Insecte Stérile chez les moustiques du genre Aedes

Aedes albopictus et Aedes aegypti sont deux espèces de moustiques invasives, vectrices de nombreux pathogènes et contre lesquelles les méthodes de lutte antivectorielle classiques sont peu efficaces. La Technique de l'Insecte Stérile en est une alternative durable et efficace reposant sur des lâchers répétés de grands nombres de moustiques mâles stérilisés par irradiation. Pour cela une méthode de séparation des sexes est nécessaire. Actuellement, les méthodes employées exploitent le dimorphisme de taille entre nymphes mâles et femelles, conduisant à un rendement faible, à un taux d'erreur élevé et à un gaspillage de ressources lié à l'élevage des larves femelles. Dans cette thèse, je me suis attachée à proposer une méthode de sexage résolvant ces problèmes. Pour ce faire, j'ai, dans un premier temps, inventorié les différentes méthodes de sexage développées au cours des 15 dernières années chez les Diptères. Parmi les approches prometteuses identifiées, j'ai retenu le développement de souches de sexage génétique basées sur l'intégration d'un transgène de fluorescence au sein des loci sexuels. Aussi, dans un deuxième temps, j'ai étudié chez Aedes albopictus le rôle et le fonctionnement de Nix, le gène de la masculinisation situé au coeur du locus M. Pour ce faire, j'ai construit des plasmides et généré des lignées de moustiques transgéniques exprimant les quatre isoformes principales de Nix, associées à des marqueurs fluorescents. J'ai ainsi pu démontrer que Nix était suffisant à conférer une masculinisation complète, produisant des pseudo-mâles fertiles, capables de voler et exprimant différentiellement les gènes myo-sex et myo-fem de façon similaire aux mâles naturels, malgré une certaine réduction de leur compétitivité. Par ailleurs, j'ai également observé une intégration préférentielle des constructions transgéniques à proximité du locus M par un phénomène de " transposon homing ". Ainsi, dans un troisième chapitre, je présente deux souches de sexage génétiques pour Aedes albopictus et deux pour Aedes aegypti obtenues par " transposon homing ", par transgénèse aléatoire et par transgénèse ciblée. Ces souches permettent de séparer les mâles des femelles au stade de larve néonate à l'aide d'un cytomètre en flux adapté. Elles peuvent être utilisées pour trier des mâles transgéniques directement, ou combinées pour obtenir des mâles non-transgéniques. Elles permettent en outre de diminuer la contamination par des femelles et d'augmenter le rendement en mâles. Ainsi, au cours de cette thèse j'ai construit des souches de sexage génétique pour deux vecteurs d'importance médicale, Aedes albopictus et Aedes aegypti. Ces travaux devraient contribuer à améliorer le rapport coût-efficacité de la Technique de l'Insecte Stérile, et ainsi rendre cette méthode plus accessible.

Bibliographic Details

Main Author:	Lutrat, Célia
Format:	thesis biblioteca
Language:	fre
Published:	Université de Montpellier
Subjects:	L72 - Organismes nuisibles des animaux, L10 - Génétique et amélioration des animaux, lâcher d'insectes stériles, sexage, lutte anti-insecte, vecteur de maladie, Aedes, Aedes albopictus, Aedes aegypti, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_7400, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_14228, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3885, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_8164, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_146, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_30483, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_30482,
Online Access:	http://agritrop.cirad.fr/600226/ http://agritrop.cirad.fr/600226/1/2021_LUTRAT_archivage.pdf
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