Mise au point d'un protocole de transformation génétique chez le caféier (Coffea arabica L.) grâce à la bactérie vectrice Agrobacterium tumefaciens
On envisage de transférer dans le génome des caféiers cultivés le gène d'une delta-endotoxine de Bacillus thuringiensis afin de réduire l'impact économique des insectes ravageurs sur la production de café. L'effet d'agents de sélection in vitro et d'agent bactériostatiques sur l'embryogenèse somatique à partir de fragments foliaires de Cof fea arabica L. génotype ^F2.1 a été étudié dans le but de mettre au point un protocole de transformation des caféiers cultivés utilisant le vecteur bactérien Agrobacterium tumefaciens. La cefotaxime est apparue phytotoxique et inhibe l'embryogenèse somatique sur milieu de Yasuda à partir de ces expiants. La carbenicilline provoque la croissance d'un cal volumineux à partir de la section des expiants. La kanamycine inhibe totalement l'embryogenèse somatique à une concentration supérieure à 125mg/l. Cet antibiotique pourra être utilisé comme agent sélectif dans le protocole de transformation. Les tentatives de transformation d'expiants foliaires, de fragments de tiges, d'hypocotyles et de feuilles cotylédonnaires, avec des souches bactériennes sauvages ou désarmées, n'ont pas permis de détecter de cellules transformées. Un test de visualisation de l'expression du gène marqueur GUS dans le cytoplasme de cellules transformées a été mis au point sur coupes de ^^m d'épaisseur d'expiants fixés inclus dans la résine.
| Main Author: | |
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| Format: | thesis biblioteca |
| Language: | fre |
| Published: |
INA-PG
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| Subjects: | F30 - Génétique et amélioration des plantes, Coffea arabica, transformation génétique, Agrobacterium tumefaciens, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_1721, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3220, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_27444, |
| Online Access: | http://agritrop.cirad.fr/562972/ |
| Tags: |
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| Summary: | On envisage de transférer dans le génome des caféiers cultivés le gène d'une delta-endotoxine de Bacillus thuringiensis afin de réduire l'impact économique des insectes ravageurs sur la production de café. L'effet d'agents de sélection in vitro et d'agent bactériostatiques sur l'embryogenèse somatique à partir de fragments foliaires de Cof fea arabica L. génotype ^F2.1 a été étudié dans le but de mettre au point un protocole de transformation des caféiers cultivés utilisant le vecteur bactérien Agrobacterium tumefaciens. La cefotaxime est apparue phytotoxique et inhibe l'embryogenèse somatique sur milieu de Yasuda à partir de ces expiants. La carbenicilline provoque la croissance d'un cal volumineux à partir de la section des expiants. La kanamycine inhibe totalement l'embryogenèse somatique à une concentration supérieure à 125mg/l. Cet antibiotique pourra être utilisé comme agent sélectif dans le protocole de transformation. Les tentatives de transformation d'expiants foliaires, de fragments de tiges, d'hypocotyles et de feuilles cotylédonnaires, avec des souches bactériennes sauvages ou désarmées, n'ont pas permis de détecter de cellules transformées. Un test de visualisation de l'expression du gène marqueur GUS dans le cytoplasme de cellules transformées a été mis au point sur coupes de ^^m d'épaisseur d'expiants fixés inclus dans la résine. |
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