Embriogênese somática do mamoeiro e estabelecimento de um protocolo de seleção com Glufosinato de Amônio (GA) visando à geração de plantas geneticamente modificadas.
O Brasil é o principal produtor mundial de mamão, sendo responsável por 10% da área plantada e 25% da produção mundial em 2006, o que mostra uma alta produtividade da cultura no país. O desenvolvimento da cultura do mamoeiro tem sido limitado por diversos fatores como os relacionados à sua natureza dióica, à heterozigose, à suscetibilidade a doenças e à falta de métodos comerciais de multiplicação vegetativa. A embriogênese somática tem sido bem estudada em vários cultivares comerciais de mamoeiro. Esta técnica é, portanto, o meio pelo qual células somáticas se desenvolvem em estruturas que se assemelham aos embriões zigóticos (isto é, bipolar e sem conexão vascular ao tecido parental) com uma série de estádios embriológicos característicos, sem fusão de gametas. O presente trabalho teve como objetivo induzir e desenvolver calos e embriões somáticos da variedade de mamoeiro Sunrise a partir de sementes oriundas de frutos imaturos de mamão presentes no BAG de mamão (Banco Ativo de Germoplasma) situado na Embrapa Mandioca e Fruticultura. Os frutos imaturos com aproximadamente 90 a 120 dias foram coletados no BAG, lavados com água corrente e hipoclorito 2%, e posteriormente, encaminhados para câmara de fluxo laminar, onde foi realizado o processo de desinfestação em condições assépticas. O meio de cultura foi composto de 1/2MS suplementado com 10mg/L de 2,4-D (ácido diclorofenoxiacético), 60g/L de sacarose, 10ml/L de vitamina de mamão (L-Glutamina, myo-inositol, thiamina, glycine, ácido nicotínico e piridoxina), 8g/L de ágar e pH 5,8. Para o estabelecimento da curva de seleção com calos embriogênicos de mamão utilizando como agente seletivo glufosinato de amônio. As concentrações usadas foram 0; 1; 2,5; 5; 10 e 15 mg/L. A formação de calos contendo embriões somáticos primários iniciou-se três a quatro semanas após a inoculação in vitro dos explantes, contudo pode-se observar um maior número de explantes em estádios mais tardios (torpedo e cotiledonar) após cinco semanas de cultivo. Para o experimento da curva de seleção com o herbicida glufosinato de amônio, foi possível observar inibição no crescimento e desenvolvimento de embriões somáticos nas concentrações de 5, 10 e 15 mg/L. Nossos resultados sugerem que o protocolo de indução de embriogênese somática de mamoeiro testado foi reproduzível, e apresentou uma alta frequência na indução de embriões somáticos secundários. O sistema Bar/Glufosinato de amônio (GA) para a seleção de embriões transgênicos de mamoeiro, deve ser realizado em concentração igual ou superior a 5 mg/L de GA.
| Main Authors: | , , , , , , , |
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| Other Authors: | |
| Format: | Parte de livro biblioteca |
| Language: | pt_BR por |
| Published: |
2011-12-14T11:11:11Z
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| Subjects: | Melhoramento genético., Mamão., |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/909777 |
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| Summary: | O Brasil é o principal produtor mundial de mamão, sendo responsável por 10% da área plantada e 25% da produção mundial em 2006, o que mostra uma alta produtividade da cultura no país. O desenvolvimento da cultura do mamoeiro tem sido limitado por diversos fatores como os relacionados à sua natureza dióica, à heterozigose, à suscetibilidade a doenças e à falta de métodos comerciais de multiplicação vegetativa. A embriogênese somática tem sido bem estudada em vários cultivares comerciais de mamoeiro. Esta técnica é, portanto, o meio pelo qual células somáticas se desenvolvem em estruturas que se assemelham aos embriões zigóticos (isto é, bipolar e sem conexão vascular ao tecido parental) com uma série de estádios embriológicos característicos, sem fusão de gametas. O presente trabalho teve como objetivo induzir e desenvolver calos e embriões somáticos da variedade de mamoeiro Sunrise a partir de sementes oriundas de frutos imaturos de mamão presentes no BAG de mamão (Banco Ativo de Germoplasma) situado na Embrapa Mandioca e Fruticultura. Os frutos imaturos com aproximadamente 90 a 120 dias foram coletados no BAG, lavados com água corrente e hipoclorito 2%, e posteriormente, encaminhados para câmara de fluxo laminar, onde foi realizado o processo de desinfestação em condições assépticas. O meio de cultura foi composto de 1/2MS suplementado com 10mg/L de 2,4-D (ácido diclorofenoxiacético), 60g/L de sacarose, 10ml/L de vitamina de mamão (L-Glutamina, myo-inositol, thiamina, glycine, ácido nicotínico e piridoxina), 8g/L de ágar e pH 5,8. Para o estabelecimento da curva de seleção com calos embriogênicos de mamão utilizando como agente seletivo glufosinato de amônio. As concentrações usadas foram 0; 1; 2,5; 5; 10 e 15 mg/L. A formação de calos contendo embriões somáticos primários iniciou-se três a quatro semanas após a inoculação in vitro dos explantes, contudo pode-se observar um maior número de explantes em estádios mais tardios (torpedo e cotiledonar) após cinco semanas de cultivo. Para o experimento da curva de seleção com o herbicida glufosinato de amônio, foi possível observar inibição no crescimento e desenvolvimento de embriões somáticos nas concentrações de 5, 10 e 15 mg/L. Nossos resultados sugerem que o protocolo de indução de embriogênese somática de mamoeiro testado foi reproduzível, e apresentou uma alta frequência na indução de embriões somáticos secundários. O sistema Bar/Glufosinato de amônio (GA) para a seleção de embriões transgênicos de mamoeiro, deve ser realizado em concentração igual ou superior a 5 mg/L de GA. |
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