Extracellular expression, purification and bioreactor production of tambaqui (Colossoma macropomum) growth hormone in the yeast Komagataella phaffii (formerly Pichia pastoris).

Extracellular expression, purification and bioreactor production of tambaqui (Colossoma macropomum) growth hormone in the yeast Komagataella phaffii (formerly Pichia pastoris).

Devido à sua importância zootécnica, o gene que codifica o hormônio de crescimento (GH) de diversas espécies de peixes tem sido isolado e expresso em sistemas heterólogos. Neste estudo, isolamos a sequência de cDNA do GH do tambaqui (Colossoma macropomum), espécie nativa da bacia amazônica e considerada promissora para a piscicultura brasileira, e a expressamos na levedura Komagataella phaffii GS115. A expressão heteróloga foi regulada pelo promotor AOX1 e GH de tambaqui recombinante (rtGH) foi secretado para o sobrenadante da cultura através do fator alfa de Saccharomyces cerevisiae. O rtGH foi expresso com sucesso em frascos agitados e sistemas de biorreatores e purificado por cromatografia de afinidade. No biorreator a produção atingiu 250 mg L-1. Este é o primeiro relato da expressão heteróloga, purificação e produção de rtGH em biorreator. Nossos resultados contribuem para tornar o tambaqui uma espécie alvo para futuras inovações biotecnológicas baseadas nos níveis significativos de rtGH obtidos no biorreator e nas futuras aplicações zootécnicas desta proteína, que pode ser explorada na aquicultura.

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Bibliographic Details
Main Authors: SADALLA-PINTO, E. A., ANDRADE, E. de, CARMO, E. J. do, SOUZA-NETO, J. N. de, BATISTA, L. M., BENTES-SOUSA, A. R. B., MARIÚBA, L. A. M., PASSOS, D. de F., FERNANDES, R. P., PEREIRA JUNIOR, N., PORTO, J. I. R., ASTOLFI-FILHO, S.
Other Authors: ELSON ANTONIO SADALLA-PINTO, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS; EDMAR DE ANDRADE, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS; EDSON JUNIOR DO CARMO, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS; JÚLIO NINO DE SOUZA-NETO, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS; LARISSA MATOS BATISTA, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS; ALEXANDRA REGINA BENTES DE SOUSA, CPATU; LUIS ANDRÉ MORAIS MARIÚBA, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS; DOUGLAS DE FRANÇA PASSOS, UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO; RODRIGO PIMENTEL FERNANDES, UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO; NEI PEREIRA JUNIOR, UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO; JORGE IVAN REBELO PORTO, INSTITUTO NACIONAL DE PESQUISA DA AMAZÔNIA; SPARTACO ASTOLFI-FILHO, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS.
Format: Artigo de periódico biblioteca
Language:eng
Published: 2024-05-29
Subjects:Biorreator, Peixe, Tambaqui, Colossoma Macropomum, Hormônio Animal,
Online Access:http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1164605
http://dx.doi.org/10.1590/1809-4392202301791
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Description
Summary:Devido à sua importância zootécnica, o gene que codifica o hormônio de crescimento (GH) de diversas espécies de peixes tem sido isolado e expresso em sistemas heterólogos. Neste estudo, isolamos a sequência de cDNA do GH do tambaqui (Colossoma macropomum), espécie nativa da bacia amazônica e considerada promissora para a piscicultura brasileira, e a expressamos na levedura Komagataella phaffii GS115. A expressão heteróloga foi regulada pelo promotor AOX1 e GH de tambaqui recombinante (rtGH) foi secretado para o sobrenadante da cultura através do fator alfa de Saccharomyces cerevisiae. O rtGH foi expresso com sucesso em frascos agitados e sistemas de biorreatores e purificado por cromatografia de afinidade. No biorreator a produção atingiu 250 mg L-1. Este é o primeiro relato da expressão heteróloga, purificação e produção de rtGH em biorreator. Nossos resultados contribuem para tornar o tambaqui uma espécie alvo para futuras inovações biotecnológicas baseadas nos níveis significativos de rtGH obtidos no biorreator e nas futuras aplicações zootécnicas desta proteína, que pode ser explorada na aquicultura.

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