Prospecção e produção de uma nova xilanase visando aplicação biotecnológica.
O Brasil é um importador de enzimas. Visando aumentar sua participação neste mercado e desenvolver a sua bioeconomia, novos estudos de prospecção e caracterização de enzimas são necessários. Neste trabalho, o transcriptoma de um fungo brasileiro foi analisado e uma sequência codificante de uma possível xilanase, denominada Xnd01 foi avaliada por bioinformática para identificação de similaridade com outras proteínas e presença de domínios conservados e em seguida, selecionada para expressão heteróloga. A sequência codificante para Xnd01 foi inserida no vetor pGAPZalfaA para expressão em Komagataella phaffi. Após a síntese, o vetor foi transformado em seu respectivo hospedeiro e foi possível obter clones com atividade enzimática em xilana de faia. A enzima Xnd01 foi purificada e submetida a teste de atividade enzimática em CMC, Avicel, xilana de faia, celobiose, xilobiose, maltose e salicina e em seis substratos sintéticos. Em relação aos substratos naturais, Xnd01 somente apresentou atividade em xilana de faia. Já em relação aos substratos sintéticos testados, Xnd01 apresentou atividade em p-nitrofenil-beta-D-celobiosídeo (pNPC), indicando que ela pode atuar como uma celobio-hidrolase. Novos ensaios de caracterização e determinação da especificidade desta enzima estão em processos de conclusão.
| Main Authors: | , , , , |
|---|---|
| Other Authors: | |
| Format: | Anais e Proceedings de eventos biblioteca |
| Language: | Portugues pt_BR |
| Published: |
2020-12-07
|
| Subjects: | Xilanase, Xnd01, Celobiohidrolase, Enzima, Biotecnologia, |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1127760 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Summary: | O Brasil é um importador de enzimas. Visando aumentar sua participação neste mercado e desenvolver a sua bioeconomia, novos estudos de prospecção e caracterização de enzimas são necessários. Neste trabalho, o transcriptoma de um fungo brasileiro foi analisado e uma sequência codificante de uma possível xilanase, denominada Xnd01 foi avaliada por bioinformática para identificação de similaridade com outras proteínas e presença de domínios conservados e em seguida, selecionada para expressão heteróloga. A sequência codificante para Xnd01 foi inserida no vetor pGAPZalfaA para expressão em Komagataella phaffi. Após a síntese, o vetor foi transformado em seu respectivo hospedeiro e foi possível obter clones com atividade enzimática em xilana de faia. A enzima Xnd01 foi purificada e submetida a teste de atividade enzimática em CMC, Avicel, xilana de faia, celobiose, xilobiose, maltose e salicina e em seis substratos sintéticos. Em relação aos substratos naturais, Xnd01 somente apresentou atividade em xilana de faia. Já em relação aos substratos sintéticos testados, Xnd01 apresentou atividade em p-nitrofenil-beta-D-celobiosídeo (pNPC), indicando que ela pode atuar como uma celobio-hidrolase. Novos ensaios de caracterização e determinação da especificidade desta enzima estão em processos de conclusão. |
|---|