Isolation of mesophyll protoplasts of the genus Coffea
Se describe un método rápido para el aislamiento de protoplastos a partir de hojas de café, probándose diferentes enzimas en varias combinaciones. Es posible liberar abundante cantidad de protoplastos a partir de hojas jóvenes, provenientes de varias líneas y cruzamientos, de las especies Coffea arabica y C. canephora, mediante su incubación durante 4 horas en celulasa (3 por ciento), pectoliasa (0.5 por ciento) y manitol (0.6 molal) a pH 5.8. Los protoplastos se filtraron y lavaron varias veces en agua de mar (85 por ciento), y fue necesario resuspenderlos en percoll (70 por ciento) debido a su densidad. Los protoplastos sobreviven varias semanas, y regeneran pared celular. En uno de los medios (A 43), después de 2 semanas, se observan algunas divisiones. Se están probando varios medios de cultivo con diferentes concentraciones de hormonas
Main Authors: | , |
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Format: | biblioteca |
Published: |
Oct-
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Subjects: | COFFEA ARABICA, COFFEA CANEPHORA, MESOFILO, HOJAS, MEDIO DE CULTIVO, AISLAMIENTO (TECNICA), CULTIVO DE TEJIDOS, PROTOPLASTOS, |
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Summary: | Se describe un método rápido para el aislamiento de protoplastos a partir de hojas de café, probándose diferentes enzimas en varias combinaciones. Es posible liberar abundante cantidad de protoplastos a partir de hojas jóvenes, provenientes de varias líneas y cruzamientos, de las especies Coffea arabica y C. canephora, mediante su incubación durante 4 horas en celulasa (3 por ciento), pectoliasa (0.5 por ciento) y manitol (0.6 molal) a pH 5.8. Los protoplastos se filtraron y lavaron varias veces en agua de mar (85 por ciento), y fue necesario resuspenderlos en percoll (70 por ciento) debido a su densidad. Los protoplastos sobreviven varias semanas, y regeneran pared celular. En uno de los medios (A 43), después de 2 semanas, se observan algunas divisiones. Se están probando varios medios de cultivo con diferentes concentraciones de hormonas |
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