Estudio de las proteínas de estrés térmico (HSPS) como indicador bioquímico de daño poscosecha en mandarinas Satsuma Okitsu

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la expresión de las HSPs en mandarinas Satsuma Okitsu con diferentes índices de color (IC) a cosecha sometidos a tratamiento de desverdizado y posterior conservación frigorífica, como posible indicador bioquímico de alteraciones fisiológicas. Se cosecharon dos lotes de frutos (Entre Ríos) con índices de color de -12,8 y -9,6, ambos con grado de madurez adecuados para su consumo en fresco. Estos lotes fueron sometidos a tratamiento de desverdizado (1-3 ppm etileno, 72h a 21°C), seguido de descanso (21°C 72 hs, 95% HR) y posterior conservación (30 días a 5°C) y 7 días a 20°C simulando la etapa de comercialización. El análisis se realizó a través de la expresión dos familias de HSPs: 1) la familia de HSP de bajo peso molecular (sHSPs), y 2) la familia de HSP de 70 kDa (HSP70). Se extrajeron las proteínas del flavedo de los frutos utilizando fenol buffereado. Ochenta microgramos (80 μg) de proteínas totales fueron separadas mediante SDS-PAGE y posteriormente analizadas inmunológicamente mediante la técnica de Western blot. A nivel de Western blot, el anti- HSPC1 (sHSPs) inmunoreaccionó con tres bandas proteicas con peso molecular de aprox. 22- 23, 18 y 16 kDa, en ambos lotes de frutas analizados (IC: -12,8 y -9,6). Para el lote con IC -9,6, se observaron diferencias de nivel de expresión de las proteínas de 18 y 16 kDa entre el control y los 30 días de conservación frigorífica. Respecto al lote con IC -12,8, no hubo cambios en la expresión de estas dos proteínas. Por otra parte, el anticuerpo anti-HSP70 sólo inmunoreaccionó en las muestras pertenecientes al lote con menor índice de color (-12,8), dando una única banda de 70 kDa, tanto para la muestra control como para la de 30 días de conservación frigorífica. A partir de estos resultados preliminares podríamos inferir que la expresión diferencial de las HSPs podría ser herramienta para predecir posibles alteraciones fisiológicas que minimicen las pérdidas comerciales provocadas por manchas que pudieran ocasionar el desverdizado y su posterior conservación en frío.