Neurotransmisores y sus receptores en la médula espinal de ratas diabéticas
La diabetes es un desorden endócrino-metabólico asociado con alteracionesfuncionales que entre otras incluye una disfunción sexual. Un gran porcentaje depacientes diabéticos de sexo masculino presentan trastornos de disfunción sexualasociados a problemas de impotencia en los estadios avanzados de ésta patología. Laregión lumbosacra de la médula espinal interviene en la inervación del pene a través delos nervios pélvicos y pudendos regulando de esta manera los mecanismos de erecciónpeneana y de eyaculación. El objetivo de este trabajo fue investigar los factores, quepueden estar modulando este mecanismo en la diabetes experimental. Para ello seestudiaron las características morfológicas y bioquímicas de la región lumbar6/sacro1 dela médula espinal de animales con diabetes inducida por tratamiento con estreptozotocinautilizando además otros modelos que también presentan una disminución en la respuestasexual. Metodología: Se utilizaron: l- ratas macho con diabetes inducida porestreptozotocina con o sin tratamiento con insulina, 2- ratas con hipogonadismo funcionalobtenido mediante tratamiento neonatal con monosodio glutamato (MSG), 3- ratas machogonadectomizadas (GDX) y/o adrenalectomizadas (ADX) con o sin el tratamientohormonal correspondiente, y 4- ratas macho intactas desde los 10 dias de vida hasta los 20 meses de edad. La médula espinal fue extraída por laminectomia dorsal y el tejidoprocesado según correspondiere al tipo de ensayo a realizar. Para los estudiosmorfológicos de los núcleos motores, se utilizaron técnicas histológicas (tinción de Nisslo tinción con tetraóxido de osmio) seguidas del análisis por microscopía óptica omicroscopía electrónica. Los distintos factores probablemente involucrados en laregulación de los mecanismos de erección peneana y eyaculación fueron estudiadosutilizando diversas técnicas tales como: autorradiografia cuantitativa para evaluarcambios en los receptores del sistema GABAérgico tipo GABA-B, GABA-A y sitios deunión para benzodiacepinas; los receptores mu- y delta-opioides y los receptores para losneuropéptidos ocitocina y vasopresina. La técnica de cromatografía líquida de altaperformance fue utilizada para evaluar los niveles tisulares de los aminoácidos GABA yglutamato. Técnicas de radioinmunoensayo fueron utilizadas para determinar los nivelesde testosterona plasmática y los niveles de beta-endorfinas tisulares. La técnicasinmunohistoquímica fue utilizada para determinar la localización y expresión del factorde crecimiento insulinico de tipo l (IGF-I) y la técnica histoquimica de reactividad NADPH diaforasa fue utilizada para el estudio de neuronas nitrérgicas. Resultados: Los animales diabéticos mostraron una reducción significativa del volumendel núcleo espinal del bulbocavemoso (sexualmente dimórfico), respecto al grupocontrol, como consecuencia de una reducción en el tamaño de sus motoneuronas, quepresentaron signos de degeneramiento neuronal. Todas las alteraciones fueron revertidaspor insulina. Los sistemas de neuromoduladores estudiados presentaron alteraciones enlos animales diabéticos así como en los animales con alteraciones endócrinas. El estudiodel sistema GABAéigico presentó marcación específica de los receptores en asta dorsal yregión central, con aumento significativo en la densidad de los receptores tipo GABA-Ben los animales diabéticos respecto al control, con una disminución en la afinidad y unaumento en el número total de sitios de unión. Los sitios receptores de tipo central parabenzodiacepinas presentaron una disminución significativa de su densidad, asociada condisminución en la afinidad y en el número de sitios totales en animales diabéticos. Enambos casos los valores alterados volvieron a su nivel control con el tratamiento deinsulina. Los receptores tipo GABA-A presentaron un aumento solo en los animalesdiabéticos tratados con insulina. El sistema GABAérgico presentó también alteracionesen animales GDX ó ADX y una disminución en los niveles de receptores, progresiva conla edad. Por otro lado los niveles de GABA mostraron una disminución significativa en lamédula espinal de ratas diabéticas. En el estudio del sistema opioide se observó presenciade los receptores tipo mu y delta en el asta dorsal, con disminución significativa de lostipo mu, asociada a un aumento en la constante de disociación, en animales diabéticosque fue revertida por tratamiento con insulina. No se evidenciaron cambios en losreceptores tipo delta. Los animales con diabetes experimental presentaron un aumentosignificativo en el contenido de beta-endorfinas en la medula espinal. No se observarondiferencias en los receptores mu-opioides por GDX y/o ADX. El análisis del sistema dereceptores para ocitocina y para vasopresina demostró marcación específica para ambosreceptores, el primero en asta dorsal y el segundo sobre los núcleos pudendos. El receptorpara ocitocina presentó disminución significativa de su densidad en animales diabéticos yen animales MSG respecto a sus grupos control, y el receptor para vasopresina tambiénse mostró alterado con la diabetes. En ambos casos los valores se normalizaron por elreemplazo con insulina. Además los receptores para vasopresina presentaron unadisminución significativa en ratas hembras intactas respecto a machos intactos. Losanimales GDX y los ADX presentaron disminución de la densidad de los receptores paravasopresina respecto a su control. Además se observaron diferencias significativas entrehembras y machos con menor expresión de estos receptores en los núcleos sexualesdimórficos del primer grupo. El estudio de IGF-I permitió describir la presencia de estefactor las láminas IV y V del asta dorsal y en los entrecruzamientos fibrosos de lacomisura gris ventral al epéndimo con disminución significativa del área de expresión enanimales diabéticos, en animales tratados neonatalmente con MSG y en animales GDX. El estudio de la actividad NADPH-diaforasa demostró la presencia de la NOS en lasneuronas de: las astas dorsales, de la región circundante al epéndimo, de la columnacelular intermediolateral y de los núcleos motores pudendos, presentando alteracionesmorfológicas y de actividad enzimática en los diabéticos y su reversión por tratamientocon insulina. Conclusiones: Los factores neuromoduladores estudiados se ven alteradosen la diabetes experimental inducida por estreptozotocina, y esta variación podría sergenerada tanto por la falta de insulina per se o por la hiperglucemia crónica, como por lasalteraciones de los ejes gonadal y adrenal que ocurren en esta patología. Las alteracionesen los factores neuromoduladores podrían estar involucrados en la regulación de losmecanismos de erección peneana y eyaculación modulando el tono muscular peneano através del nervio pudendo y/o la dilatación vascular que regula el flujo sanguíneo a travésdel nervio pélvico. Estos estudios aportan información de importancia para comprensiónde la fisiopatología de la disfunción sexual relacionada con la erección peneana ya seadurante estadios avanzados de la diabetes, o en modelos con analogía endócrina, quepodrán permitir el desarrollo terapéuticas para un mejoramiento en la.calidad de vida delindividuo afectado.
| Main Author: | |
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| Other Authors: | |
| Format: | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis biblioteca |
| Language: | spa |
| Published: |
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
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| Subjects: | IMPOTENCIA SEXUAL, DIABETES, ESTREPTOZOTOCINA, SISTEMA GABAERGICO, SISTEMA OPIOIDE, IGF-I, OCITOCINA, VASOPRESINA, NADPH-DIAFORASA, MEDULA ESPINAL, SEXUAL IMPOTENCE, STREPTOZOTOCINE, GABAERGIC SYSTEM, OPIOID SYSTEM, OXYTOCIN RECEPTOR, VASOPRESIN RECEPTOR, NADPH-DIAPHORASE, SPINAL CORD, |
| Online Access: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3662_Dorfman http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3662_Dorfman_oai |
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