Isolamento de células gigantes em galhas de raízes de leguminosas por microdissecção a laser (MDL).

O desenvolvimento de novas estratégias para a produção de cultivares resistentes aos nematoides das galhas inclui o maior conhecimento de genes envolvidos no desenvolvimento de células gigantes (CG), formadoras dos sítios de alimentação, durante a infecção de plantas suscetíveis por nematoides da galha. A análise transcricional baseada em todo o tecido da raiz ou da galha formada pelo parasita resulta na identificação de numerosos genes diferencialmente expressos. Para identificar genes específicos da interação planta-nematoides formadores de galhas (NFG) e genes de suscetibilidade que possibilitam a infecção, uma abordagem promissora é estudar o transcritoma específico das CGs. Neste estudo, a técnica de microdissecção a laser foi estabelecida para isolamento de CGs produzidas por Meloidogyne spp., em formação nas raízes de leguminosas (soja e amendoim) suscetíveis. Para tal, CGs de segmentos de raízes coletados após a inoculação com Juvenis 2 (J2) e incluidos em Paraplast foram microdissectadas a laser, e utilizadas para extração do RNA, seguida da síntese de DNA complementar, e da amplificação por PCR de genes expressos constitutivamente, como indicação indireta da integridade do RNA. O detalhamento do método e fluxo de trabalho aqui descritos para microdissecção a laser de CGs e células vasculares das raízes dessas leguminosas, com subsequente isolamento de RNA, constitui uma ferramenta importante para a análise molecular detalhada durante a interação planta-patógeno.

Bibliographic Details

Main Authors:	NIELEN, S., SA, M. F. G. de, GUIMARAES, P. M., ARAUJO, A. C. G. de
Other Authors:	STEPHAN NIELEN, Biólogo, doutor em Ciências Naturais, bolsista na Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Brasília, DF.; MARIA FATIMA GROSSI DE SA, Cenargen; PATRICIA MESSENBERG GUIMARAES, Cenargen; ANA CLAUDIA GUERRA DE ARAUJO, Cenargen.
Format:	Folhetos biblioteca
Language:	Portugues pt_BR
Published:	2023
Subjects:	Microdissecção a laser, Laser microdissection, Single-cell transcriptome, Nematoides das galhas, Transcritoma célula-específico, Células gigantes, Soja, Amendoim, Root-knot nematodes, Giant cells, Soybeans, Peanuts,
Online Access:	http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/1152268
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!