Considerações estatísticas na análise de dados de expressão gênica gerados pela técnica de RT-qPCR.

A transcriptase reversa (RT) seguida de quantificação utilizando a técnica da reação em cadeia da polimerase (qPCR) em tempo real ou, simplesmente reverse transcription-qPCR (RT-qPCR), é um método in vitro para amplificação enzimática de sequências definidas de DNA complementar obtido a partir do RNA. A técnica de RT-qPCR é uma das mais utilizadas em experimentos de quantificação da expressão gênica por ser considerado um dos métodos mais sensível e específico de quantificação gênica dos que outros utilizados para esta finalidade. No entanto, para obter resultados, pela técnica de RT-qPCR, que possam ser adequadamente analisados é necessário que o experimento tenha um desenho experimental com tratamentos, ensaios, unidade experimental e delineamento bem definidos. Muitas vezes, as considerações estatísticas, principalmente, no delineamento experimental para distribuição dos genes e das amostras (biológicas e técnicas) na placa de PCR (para controle de variação) não são consideradas e, dados gerados dessa maneira não são confiáveis. Após obtenção dos resultados da quantificação é primordial, antes de qualquer análise, avaliar a distribuição dos dados por meio de testes de normalidade. Baseado nisso, recomenda-se, para a comunidade acadêmica, como um roteiro prático para o correto delineamento experimental e a correta análise estatística dos dados para experimentos que utilizam a técnica de RT-qPCR.

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Bibliographic Details
Main Authors: LOBO, A. M. B. O., LOBO, R. N. B.
Other Authors: ANA MARIA BEZERRA OLIVEIRA LOBO, CNPC; RAIMUNDO NONATO BRAGA LOBO, CNPC.
Format: Folhetos biblioteca
Language:pt_BR
por
Published: 2014
Subjects:RT-qPCR, Expressão gênica, Expressão gênica relativa, RT-PCR, Genetic processes, Genética animal, Genética molecular, Gene expression, Genetics,
Online Access:http://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/infoteca/handle/doc/1007398
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