Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna em ovinos.

O objetivo deste trabalho foi desenvolver e padronizar um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna (MV). Produziu-se o antígeno em sobrenadantes de cultivo celular de membrana sinovial caprina (MSC) inoculado com o Maedi Visna Vírus (MVV) cepa K1514, que passou por ciclos de congelamento e descongelamento, sendo logo após clarificado por centrifugação a 3.000 g por 40 minutos A suspensão clarificada foi precipitada por PEG 8000, centrifugada a 12.000 g por 60 minutos, o pellet ressuspendido em TNE (Tampão Tris-HCl, NaCl, EDTA) e ultracentrifugado a 42.000 g por 105 minutos em colchão de sacarose, e ressuspendido em PBS contendo phenylmethylsulphonyl fluoride (PMSF). Realizou-se o ELISA em microplacas de 96 poços, incubadas por 1h a 37 ºC, utilizando-se como revelador o-phenylenediamine (OPD). Para a comparação entre os testes de ELISA e AGID, utilizaram-se 175 amostras de soros. A concentração ótima do antígeno foi a de 2 µg/mL e a melhor diluição dos soros, controles e testes de 1:100. O ELISA detectou um maior número de positivos (40) que o AGID (11), apresentando uma sensibilidade de 91%, especificidade de 82%. O ELISA promoveu uma melhor sensibilidade que o AGID. Embora sua especificidade tenha ficado abaixo do esperado, seu uso pode ser indicado como teste de diagnóstico de MVV.

Bibliographic Details

Main Authors:	DANTAS, T. V. M., ARAÚJO, S. A. C. de, PINHEIRO, R. R., ARAGÃO, M. A. do C., SILVA, J. B. A. da, RICARTE, A. R. F., RIBEIRO, A. L., TEIXEIRA, M. F. da S.
Other Authors:	Tânia Valeska Medeiros Dantas, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Suzana Aparecida Costa de Araújo, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); RAYMUNDO RIZALDO PINHEIRO, CNPC; Maria Alzira do Carmo Aragão, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Jean Berg Alves da Silva, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Aracely Rafaelle Fernandes Ricarte, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Adriana Lopes Ribeiro, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Maria Fátima da Silva Teixeira, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE).
Format:	Artigo de periódico biblioteca
Language:	pt_BR por
Published:	2008-05-27
Subjects:	Maedi visna, Diagnóstico sorológico, Teste, Brasil, Ceará., Elisa, Doença Animal, Ovino., Lentivirus.,
Online Access:	http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/534052
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!