Reamplificação de fragmentos do cDNA do gene da "lacrimejação" da cebola amplificado por PCR e excisados de gel de poliacrilamida.
O objetivo deste trabalho foi a reamplificação e visualização em gel de agarose e de poliacrilamida denaturante de dois fragmentos do cDNA da sintase do fator de lacrimejação (SFL), amplificados por PCR em 15 genótipos de cebola e um de Allium tuberosum Rottl. Ex Spreng, para analisar-se a reprodutibilidade dos mesmos. As bandas dos fragmentos de 330 e 260 pb, excisadas do gel de poliacrilamida, foram reamplificadas e visualizadas com sucesso em gel de agarose 1,5% e poliacrilamida, não sendo observadas contaminações entre as bandas. As bandas do fragmento de 330 pb foram novamente amplificadas em todos os genótipos, exceto A. tuberosum, enquanto a reamplificação do fragmento de 260 bp resultou em dois fragmentos, sendo um de 330 e outro de 260 pb, reproduzindo o resultado da amplificação. Estes resultados indicam que o fragmento inesperado visualizado, excisado do gel de poliacrilamida, re-amplificado, revisualizado em gel de agarose e poliacrilamida denaturante não é um artefato, mas resultado de amplificação diferenciada na região alvo do cDNA da SFL. A reamplificação dos fragmentos de 330 e 260 pb a partir do fragmento excisado de 260 pb permanece, contudo, sem explicação, sendo que outros estudos são necessários para elucidar a natureza do fragmento de 260 pb. Screening via PCR dentro das famílias de meio-irmãs (FMI) das plantas deste estudo são também necessários para observar-se a consistência genética da amplificação do fragmento de 260 pb numa dada FMI.
| Main Authors: | , , , |
|---|---|
| Other Authors: | |
| Format: | Artigo de periódico biblioteca |
| Language: | pt_BR por |
| Published: |
2008-02-08
|
| Subjects: | Lacrimejação, PCR, Gel poliacrilamida, Onion., Cebola., |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/160567 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|