Actas
Los fines principales son los de desarrollar un método in vitro para una producción somática óptima de embroides a partir de ex-plantas de cacao y el explorar cuales puedan ser las condiciones necesarias para germinación del embroide y posterior desarrollo en plántulas. Los objetivos finales, entre otros, serían el utilizar la variación somática probable que podría producirse, para la mejora del cultivo y también el proporcionar materiales y técnicas para una rápida aplicación de mutagen in vitro para un trabajo de producción con resistencia a enfermedades. Para obtener embroides somáticos se separaron almendras no maduras de mazorcas de cien días de tres tipos de cacao, Amelonado (P30), T79/501 y T63/967, en cotiledones y embriones zigóticos y se inocularon en un medio básico consistente en macro y micro nutrientes de Murashige & Skoog (MS), suplementado con sucrosa (40 g/L), hidrolisato de caseína (2 g/L), agua de coco (15 por ciento), agar (8 g/L) y distintos niveles tanto de tiamina (0,5-2,0 mg/L) como de ácido acético de naftalina (5,0-20,0 micra M) a un pH de 5,8. La incubación se hizo a 2 grados centígrados en la oscuridad durante siete semanas y los embroides formados fueron separados y las ex-plantas una vez más sub-cultivadas en el mismo medio durante siete semanas. Para encontrar el mejor medio para la germinación se cultivaron embroides aislados durante siete días en uno de los siguientes medios: MS pleno más tiamina (1 mg/L), sucrosa (30 g/L), sulfato de adenina (80 mg/L), zeatina (1 micra M/L), cisteína-HCl (10 mg/L), con o sin agar (7 g/L) y distintas concentraciones de NAA (0,01-10,0 micra M) y GA3 (1,0-3 micra M); y (2) un medio líquido hecho de MS (1/2) con distintos niveles de sucrosa (2-10 por ciento). Los embroides germinados fueron luego transferidos con o sin sus cotiledones a un medio sólido o líquido con GA3 bajo (1 micra M) o alto (3 micra M). Todos los niveles de tiamina y NAA promovieron callos y proliferación de embroides pero las concentraciones de 1 mg de tiamina y 10 micra M de NAA produjeron el número más elevado de embroides por cotiledón. Se observaron diferencias varietales en la capacidad de producir embroides además de en la tasa de producción de embroides y el T63/967 presentó el más elevado de esos dos atributos, seguido de T79/501, seguido del amelonado. Las tentativas de germinar los embroides en un medio completamente sólido resultó sólo en la formación de callo mientras que todos los medios líquidos apoyaron la germinación de los embroides. Parece haber un factor endógeno que tiene que ser lixiviado de los embroides para evitar la formación de callo y promover la germinación. El medio líquido de MS (1/2) y 5 por ciento de sucrosa dio la más alta germinación. La transferencia de los embroides germinados a un medio sólido ya fuere con niveles de GA3 bajo (1 micra M) o alto (3 micra M) resultaron en un desarrollo excesivo del cotiledón del embroide mientras que desaparecía el embroide principal. Sin embargo la remoción de los cotiledones de los embroides germinados seguida del sub-cultivo en un medio líquido con GA3 elevado (3 micra M) realzó la diferenciación de los embroides de producir plántulas. Se trata en la comunicación de un protocolo para la producción de plántulas mediante embroides somáticos en cultivo de tejido de cacao
| Main Authors: | , , |
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| Format: | biblioteca |
| Published: |
Hertford (RU) Stephen Austin and Sons
1988
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| Subjects: | THEOBROMA CACAO, CULTIVO DE EMBRIONES, CULTIVO DE TEJIDOS, EXPLANTES, EMBRIOGENESIS ASEXUAL, |
| Tags: |
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