Evaluación de la enucleación asistida por demecolcina como método para evitar la exposición a luz UV en la producción de embriones bovinos por técnica de clonación. Evaluation of demecolcine assisted enucleation as a method to avoid the UV exposure in the bovine embryos production by cloning.
La clonación es una técnica con gran potencial científico y económico, aunque aun ineficiente.. La luz ultravioleta [UV] utilizada durante la enucleación del ovocito genera cambios estructurales y funcionales, afectando la viabilidad de los embriones reconstituidos.. El inhibidor de microtubulos demecolcina [DMC] permite generar una protrusión visible conteniendo al núcleo del ovocito, evitando la utilización de luz UV para su ubicación y extracción.. Inicialmente los ovocitos fueron tratados con 0,4 micro gramo/ml DMC durante toda la maduraciónin vitro [24h] o desde las 21h, obteniendo un 61,4 por ciento y 87 por ciento de núcleos ubicados en protrusión, respectivamente.. En un segundo experimento los ovocitos fueron tratados con 0,4 micro gramo/ml DMC luego de exposición a ionomicina, logrando un 52,7 por ciento de eficiencia.. Finalmente, se extrajeron los núcleos de ovocitos con protrusión generados con el mejor tratamiento [DMC21h], sin exponerlos a radiación UV.. Cada ovocito enucleado sin zona pelucida fue electro - fusionado con una blastomera de un embrión FIV de 8 células.. El grupo control no se expuso a DMC y se utilizó luz UV en la enucleación.. No hubo diferencias estadísticas en las tasas de clivaje [67 por ciento vs 76 por ciento] ni de blastocistos [7,4 por ciento vs 3,8 por ciento] entre ambos grupos, aunque con el nuevo tratamiento la enucleación resultó tecnicamente más sencillo.
| Main Authors: | , , , |
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| Format: | Texto biblioteca |
| Language: | spa |
| Subjects: | CLONACION, INGENIERIA GENETICA, BOVINAE, EMBRIONES ANIMALES, RADIACION ULTRAVIOLETA, METODOS DE MEJORAMIENTO GENETICO, |
| Online Access: | http://ceiba.agro.uba.ar/cgi-bin/koha/opac-detail.pl?biblionumber=29829 |
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