Actas

Los objetivos principales consistían en desarrollar un procedimiento in vitro para un crecimiento de punta de brote de cacao a ser usado en (a) obtención de plantas libres de virus, (b) establecimiento de una colección de germoplasma, (c) aplicación de mutagen in vitro para ahorrar espacio y tiempo y (d) multiplicación en masa de cacao. Se plantaron almendras maduras de dos variedades de cacao: Amelonado (P30) y T79/501 en condiciones asépticas en tubos de prueba que contenían un medio hecho de sales de Murashige & Skoog a media fuerza (MS), sucrosa (8 por ciento) y agar (7 por ciento). Dos o cuatro semanas más tarde se cortaron puntas de 0,5-3,0 mm de las plántulas resultantes y se cultivaron en el medio siguiente durante cuatro semanas; MS (plena fuerza), tiamina (1 mg/L), sucrosa (30 g/L), sulfato de adenina (80 mg/L), zeatina ( 1 micra M), Cysteína-HCl (10 mg/L), agua de coco 10 por ciento y distintos niveles de NAA (0,01-2,0) y GA3 (1-3 micra M) a un pH de 5,8. Las puntas de brotes fueron luego subcultivadas durante cuatro semanas ya sea en un medio como el indicado anteriormente, con o sin agar, o en medio líquido conteniendo MS (a media fuerza) y 5 por ciento de sucrosa. En un segundo experimento se cortaron también puntas de brotes secundarios que se desarrollaron después de la remoción de las puntas de los brotes primarios de las plántulas y se sometieron al mismo procedimiento descrito anteriormente. En un tercer experimento las puntas, tanto de brotes primarios como secundarios, fueron sometidas a bajas dosis de irradiación gamma oscilando entre 100-400 rad antes de cultivarlas como se describe. Tanto las puntas de brotes primarios como de secundarios cultivadas en medio de sólo agar dieron como resultado un ligero alargamiento inicial pero ésto fue seguido de una formación excesiva de callo sin crecimiento alguno en la punta del brote. El sub-cultivo de las puntas de brote en un medio sólo líquido promovió un rápido alargamiento de las puntas de brotes pero la solución de sucrosa sólo pudo apoyar el crecimiento hasta un total de siete días. Para un rápido alargamiento de las puntas de brotes y posterior desarrollo de plantas de las puntas de brote se ha propuesto el cultivar las puntas de brote primero en un medio de agar con 0,01 micra M de NAA y 1 micra M de GA3 durante 4 semanas y después transferirlo a un medio líquido con las mismas concentraciones de NAA y GA3 durante dos semanas, seguido de un sub-cultivo en medio de agar con NAA (0,05 micra M) y GA3 (3 micra M). Las puntas de brotes secundarios crecen más rápidamente en esa condición que las puntas de brotes primarios. También el T79/501 crece más rápidamente que el Amelonado ya sea como punta de brote primario o secundario. El sometimiento de las puntas de brote a bajas dosis de irradiación gamma reducía o eliminaba la formación de callo y promovía el alargamiento de la punta del brote incluso en medio sólido. El mejor crecimiento se obtuvo cuando las puntas se sometieron a rayos gamma en la gama comprendida entre 300 y 400 rad. Se trata de un protocolo para la manipulación de puntas de brote de cacao a plantas en un medio de cultivo

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Main Authors: 40194 Adu Ampomah, Y., 99790 Novak, F.J., 40239 Afza, R., 127259 Van Duren, M., 5324 Cocoa Producers' Alliance, Lagos (Nigeria), 31948 10. International Cocoa Research Conference Santo Domingo (R. Dominicana) 17-23 May 1987
Format: biblioteca
Published: Hertford (RU) Stephen Austin and Sons 1988
Subjects:THEOBROMA CACAO, CULTIVO DE TEJIDOS, MERISTEMAS, CLONES AMELONADOS, TALLO, METODOS,
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description Los objetivos principales consistían en desarrollar un procedimiento in vitro para un crecimiento de punta de brote de cacao a ser usado en (a) obtención de plantas libres de virus, (b) establecimiento de una colección de germoplasma, (c) aplicación de mutagen in vitro para ahorrar espacio y tiempo y (d) multiplicación en masa de cacao. Se plantaron almendras maduras de dos variedades de cacao: Amelonado (P30) y T79/501 en condiciones asépticas en tubos de prueba que contenían un medio hecho de sales de Murashige & Skoog a media fuerza (MS), sucrosa (8 por ciento) y agar (7 por ciento). Dos o cuatro semanas más tarde se cortaron puntas de 0,5-3,0 mm de las plántulas resultantes y se cultivaron en el medio siguiente durante cuatro semanas; MS (plena fuerza), tiamina (1 mg/L), sucrosa (30 g/L), sulfato de adenina (80 mg/L), zeatina ( 1 micra M), Cysteína-HCl (10 mg/L), agua de coco 10 por ciento y distintos niveles de NAA (0,01-2,0) y GA3 (1-3 micra M) a un pH de 5,8. Las puntas de brotes fueron luego subcultivadas durante cuatro semanas ya sea en un medio como el indicado anteriormente, con o sin agar, o en medio líquido conteniendo MS (a media fuerza) y 5 por ciento de sucrosa. En un segundo experimento se cortaron también puntas de brotes secundarios que se desarrollaron después de la remoción de las puntas de los brotes primarios de las plántulas y se sometieron al mismo procedimiento descrito anteriormente. En un tercer experimento las puntas, tanto de brotes primarios como secundarios, fueron sometidas a bajas dosis de irradiación gamma oscilando entre 100-400 rad antes de cultivarlas como se describe. Tanto las puntas de brotes primarios como de secundarios cultivadas en medio de sólo agar dieron como resultado un ligero alargamiento inicial pero ésto fue seguido de una formación excesiva de callo sin crecimiento alguno en la punta del brote. El sub-cultivo de las puntas de brote en un medio sólo líquido promovió un rápido alargamiento de las puntas de brotes pero la solución de sucrosa sólo pudo apoyar el crecimiento hasta un total de siete días. Para un rápido alargamiento de las puntas de brotes y posterior desarrollo de plantas de las puntas de brote se ha propuesto el cultivar las puntas de brote primero en un medio de agar con 0,01 micra M de NAA y 1 micra M de GA3 durante 4 semanas y después transferirlo a un medio líquido con las mismas concentraciones de NAA y GA3 durante dos semanas, seguido de un sub-cultivo en medio de agar con NAA (0,05 micra M) y GA3 (3 micra M). Las puntas de brotes secundarios crecen más rápidamente en esa condición que las puntas de brotes primarios. También el T79/501 crece más rápidamente que el Amelonado ya sea como punta de brote primario o secundario. El sometimiento de las puntas de brote a bajas dosis de irradiación gamma reducía o eliminaba la formación de callo y promovía el alargamiento de la punta del brote incluso en medio sólido. El mejor crecimiento se obtuvo cuando las puntas se sometieron a rayos gamma en la gama comprendida entre 300 y 400 rad. Se trata de un protocolo para la manipulación de puntas de brote de cacao a plantas en un medio de cultivo
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Dos o cuatro semanas más tarde se cortaron puntas de 0,5-3,0 mm de las plántulas resultantes y se cultivaron en el medio siguiente durante cuatro semanas; MS (plena fuerza), tiamina (1 mg/L), sucrosa (30 g/L), sulfato de adenina (80 mg/L), zeatina ( 1 micra M), Cysteína-HCl (10 mg/L), agua de coco 10 por ciento y distintos niveles de NAA (0,01-2,0) y GA3 (1-3 micra M) a un pH de 5,8. Las puntas de brotes fueron luego subcultivadas durante cuatro semanas ya sea en un medio como el indicado anteriormente, con o sin agar, o en medio líquido conteniendo MS (a media fuerza) y 5 por ciento de sucrosa. En un segundo experimento se cortaron también puntas de brotes secundarios que se desarrollaron después de la remoción de las puntas de los brotes primarios de las plántulas y se sometieron al mismo procedimiento descrito anteriormente. En un tercer experimento las puntas, tanto de brotes primarios como secundarios, fueron sometidas a bajas dosis de irradiación gamma oscilando entre 100-400 rad antes de cultivarlas como se describe. Tanto las puntas de brotes primarios como de secundarios cultivadas en medio de sólo agar dieron como resultado un ligero alargamiento inicial pero ésto fue seguido de una formación excesiva de callo sin crecimiento alguno en la punta del brote. El sub-cultivo de las puntas de brote en un medio sólo líquido promovió un rápido alargamiento de las puntas de brotes pero la solución de sucrosa sólo pudo apoyar el crecimiento hasta un total de siete días. Para un rápido alargamiento de las puntas de brotes y posterior desarrollo de plantas de las puntas de brote se ha propuesto el cultivar las puntas de brote primero en un medio de agar con 0,01 micra M de NAA y 1 micra M de GA3 durante 4 semanas y después transferirlo a un medio líquido con las mismas concentraciones de NAA y GA3 durante dos semanas, seguido de un sub-cultivo en medio de agar con NAA (0,05 micra M) y GA3 (3 micra M). Las puntas de brotes secundarios crecen más rápidamente en esa condición que las puntas de brotes primarios. También el T79/501 crece más rápidamente que el Amelonado ya sea como punta de brote primario o secundario. El sometimiento de las puntas de brote a bajas dosis de irradiación gamma reducía o eliminaba la formación de callo y promovía el alargamiento de la punta del brote incluso en medio sólido. El mejor crecimiento se obtuvo cuando las puntas se sometieron a rayos gamma en la gama comprendida entre 300 y 400 rad. Se trata de un protocolo para la manipulación de puntas de brote de cacao a plantas en un medio de cultivoLos objetivos principales consistían en desarrollar un procedimiento in vitro para un crecimiento de punta de brote de cacao a ser usado en (a) obtención de plantas libres de virus, (b) establecimiento de una colección de germoplasma, (c) aplicación de mutagen in vitro para ahorrar espacio y tiempo y (d) multiplicación en masa de cacao. Se plantaron almendras maduras de dos variedades de cacao: Amelonado (P30) y T79/501 en condiciones asépticas en tubos de prueba que contenían un medio hecho de sales de Murashige & Skoog a media fuerza (MS), sucrosa (8 por ciento) y agar (7 por ciento). Dos o cuatro semanas más tarde se cortaron puntas de 0,5-3,0 mm de las plántulas resultantes y se cultivaron en el medio siguiente durante cuatro semanas; MS (plena fuerza), tiamina (1 mg/L), sucrosa (30 g/L), sulfato de adenina (80 mg/L), zeatina ( 1 micra M), Cysteína-HCl (10 mg/L), agua de coco 10 por ciento y distintos niveles de NAA (0,01-2,0) y GA3 (1-3 micra M) a un pH de 5,8. Las puntas de brotes fueron luego subcultivadas durante cuatro semanas ya sea en un medio como el indicado anteriormente, con o sin agar, o en medio líquido conteniendo MS (a media fuerza) y 5 por ciento de sucrosa. En un segundo experimento se cortaron también puntas de brotes secundarios que se desarrollaron después de la remoción de las puntas de los brotes primarios de las plántulas y se sometieron al mismo procedimiento descrito anteriormente. En un tercer experimento las puntas, tanto de brotes primarios como secundarios, fueron sometidas a bajas dosis de irradiación gamma oscilando entre 100-400 rad antes de cultivarlas como se describe. Tanto las puntas de brotes primarios como de secundarios cultivadas en medio de sólo agar dieron como resultado un ligero alargamiento inicial pero ésto fue seguido de una formación excesiva de callo sin crecimiento alguno en la punta del brote. El sub-cultivo de las puntas de brote en un medio sólo líquido promovió un rápido alargamiento de las puntas de brotes pero la solución de sucrosa sólo pudo apoyar el crecimiento hasta un total de siete días. Para un rápido alargamiento de las puntas de brotes y posterior desarrollo de plantas de las puntas de brote se ha propuesto el cultivar las puntas de brote primero en un medio de agar con 0,01 micra M de NAA y 1 micra M de GA3 durante 4 semanas y después transferirlo a un medio líquido con las mismas concentraciones de NAA y GA3 durante dos semanas, seguido de un sub-cultivo en medio de agar con NAA (0,05 micra M) y GA3 (3 micra M). Las puntas de brotes secundarios crecen más rápidamente en esa condición que las puntas de brotes primarios. También el T79/501 crece más rápidamente que el Amelonado ya sea como punta de brote primario o secundario. El sometimiento de las puntas de brote a bajas dosis de irradiación gamma reducía o eliminaba la formación de callo y promovía el alargamiento de la punta del brote incluso en medio sólido. El mejor crecimiento se obtuvo cuando las puntas se sometieron a rayos gamma en la gama comprendida entre 300 y 400 rad. Se trata de un protocolo para la manipulación de puntas de brote de cacao a plantas en un medio de cultivoTHEOBROMA CACAOCULTIVO DE TEJIDOSMERISTEMASCLONES AMELONADOSTALLOMETODOSURN:ISBN:095076910X