Regeneración de plantas a través de la embriogénesis somática en tres híbridos etíopes (ABA BUNA, GHAWE y MCH2) de Coffea arabica

41234 Alemayehu, T.; 65017 Endale, G.; 90787 Martínez, F.; 108771 Ramos, R.A.; 132008 Wondyifraw, T.; 133357 Zerihun, A.; 7684 Estación Central de Investigaciones de Café y Cacao, Santiago de Cuba (Cuba)

Regeneración de plantas a través de la embriogénesis somática en tres híbridos etíopes (ABA BUNA, GHAWE y MCH2) de Coffea arabica

En las últimas dos décadas, productores del Centro de la Investigación Agrícola de Jimma (JARC), de Etiopía, desarrollaron tres híbridos de cafe arabica: Aba Buna, Ghawe y MCH, que exhibieron heterosis sobre sus progenitores en la mayoria de los caracteres de importancia económica y agronómica. El estudio presente se diseño con el objetivo de establecer protocolos para la regeneración de estos tres híbridos de caféÀ etiopes a través de la embriogenesis somatica. El experimento se realizó en el Laboratorio de Biotecnología de plantas del JARC en los períodos entre septiembre 2005 y junio 2007. Se colectaron las hojas total mente desarrolladas y saludables sanitariamente en el invernadero con plántulas de café en crecimiento. Se pro baron diferentes medios basales y combinaciones de hormonas para la formación y proliferación del callo, la induccion de embriones somáticos, asi como el desarrollo y crecimiento del embrión. Se transfirieron plántulas in vitro teniendo de tres a cinco pares de hojas a la aclimatacion ex-vitro en bandejas IIenas de tierra esteril y cáscara de café bien descompuesta (1:1). La mejor respuesta de las hojas en las plántulas fueron las coleccionadas en los primero y segundo nudos (copa a la base) de las plántulas de cafe crecidas en el invernadero. El medio Murashige y Skoog 1962, complementado con 3mglL de 2,4-D y BA fue el mejor, con 90 a 100% de formación de callo, de los cuales del 45 a 50% son embriogénicos. EI medio de cultivo que contiene una combinacion de NAA (0,1 mglL) y Kinetin (0,5 mglL) reportó el numero más alto de embriones somáticos. EI uso de medios liquidos para el desarrollo del embrión somático demostró ser beneficioso reduciendo costo de producción de las plántulas y aumentando la proporción de desarrollo del embrión somático lo que revela perspectivas potenciales para la automatización de éstas técnicas.

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Main Authors:	41234 Alemayehu, T., 65017 Endale, G., 90787 Martínez, F., 108771 Ramos, R.A., 132008 Wondyifraw, T., 133357 Zerihun, A., 7684 Estación Central de Investigaciones de Café y Cacao, Santiago de Cuba (Cuba)
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description	En las últimas dos décadas, productores del Centro de la Investigación Agrícola de Jimma (JARC), de Etiopía, desarrollaron tres híbridos de cafe arabica: Aba Buna, Ghawe y MCH, que exhibieron heterosis sobre sus progenitores en la mayoria de los caracteres de importancia económica y agronómica. El estudio presente se diseño con el objetivo de establecer protocolos para la regeneración de estos tres híbridos de caféÀ etiopes a través de la embriogenesis somatica. El experimento se realizó en el Laboratorio de Biotecnología de plantas del JARC en los períodos entre septiembre 2005 y junio 2007. Se colectaron las hojas total mente desarrolladas y saludables sanitariamente en el invernadero con plántulas de café en crecimiento. Se pro baron diferentes medios basales y combinaciones de hormonas para la formación y proliferación del callo, la induccion de embriones somáticos, asi como el desarrollo y crecimiento del embrión. Se transfirieron plántulas in vitro teniendo de tres a cinco pares de hojas a la aclimatacion ex-vitro en bandejas IIenas de tierra esteril y cáscara de café bien descompuesta (1:1). La mejor respuesta de las hojas en las plántulas fueron las coleccionadas en los primero y segundo nudos (copa a la base) de las plántulas de cafe crecidas en el invernadero. El medio Murashige y Skoog 1962, complementado con 3mglL de 2,4-D y BA fue el mejor, con 90 a 100% de formación de callo, de los cuales del 45 a 50% son embriogénicos. EI medio de cultivo que contiene una combinacion de NAA (0,1 mglL) y Kinetin (0,5 mglL) reportó el numero más alto de embriones somáticos. EI uso de medios liquidos para el desarrollo del embrión somático demostró ser beneficioso reduciendo costo de producción de las plántulas y aumentando la proporción de desarrollo del embrión somático lo que revela perspectivas potenciales para la automatización de éstas técnicas.
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Se colectaron las hojas total mente desarrolladas y saludables sanitariamente en el invernadero con plántulas de café en crecimiento. Se pro baron diferentes medios basales y combinaciones de hormonas para la formación y proliferación del callo, la induccion de embriones somáticos, asi como el desarrollo y crecimiento del embrión. Se transfirieron plántulas in vitro teniendo de tres a cinco pares de hojas a la aclimatacion ex-vitro en bandejas IIenas de tierra esteril y cáscara de café bien descompuesta (1:1). La mejor respuesta de las hojas en las plántulas fueron las coleccionadas en los primero y segundo nudos (copa a la base) de las plántulas de cafe crecidas en el invernadero. El medio Murashige y Skoog 1962, complementado con 3mglL de 2,4-D y BA fue el mejor, con 90 a 100% de formación de callo, de los cuales del 45 a 50% son embriogénicos. EI medio de cultivo que contiene una combinacion de NAA (0,1 mglL) y Kinetin (0,5 mglL) reportó el numero más alto de embriones somáticos. EI uso de medios liquidos para el desarrollo del embrión somático demostró ser beneficioso reduciendo costo de producción de las plántulas y aumentando la proporción de desarrollo del embrión somático lo que revela perspectivas potenciales para la automatización de éstas técnicas.In the last two decades, breeders at Jimma Agricultural Research Center UARC), Ethiopia, had developed three arabica coffee hybrids: Aba Buna, Ghawe and MCH, that exhibited heterosis over their parents in most characters of economic and agronomic importance. The present study was designed with the objective of establishing regeneration protocols for these three Ethiopian coffee hybrids through somatic embryogenesis. The experiment was conducted at the plant biotechnology laboratory of jARC in the periods between September 2005 and june 2007. Healthy, actively growing and fully developed leaves having good sanitary condition and vigor were collected from green house raised coffee seedlings. Different basal media and hormone combinations were tested for callus formation and proliferation, somatic embryo induction, as well as embryo development and growth. In vitro rooted plantlets having 3 to 5 leaf pairs were transferred to ex-vitro acclimatization and hardening-off in seedling trays filled with sterile soil and well decomposed coffee husk (I: I). Best responding leaf explants were those collected from the first and second nodes (top to bottom) of green house grown coffee seedlings. Murashige and Skoog 1962 medium, supplemented with 3mglL of 2,4 - D and BA was the best, with 90 to 100% callus formation, of which 45 to 50% being embryogenic. Culture medium containing a combination of NAA (0,1 mglL) and Kinetin (0,5 mglL) gave the highest number of somatic embryos. The use of liquid media for somatic embryo development proved beneficial in reducing cost of plantlet production and increasing the rate of somatic embryo development, thereby revealing the potential prospects of the technique for future industrialization.En las últimas dos décadas, productores del Centro de la Investigación Agrícola de Jimma (JARC), de Etiopía, desarrollaron tres híbridos de cafe arabica: Aba Buna, Ghawe y MCH, que exhibieron heterosis sobre sus progenitores en la mayoria de los caracteres de importancia económica y agronómica. El estudio presente se diseño con el objetivo de establecer protocolos para la regeneración de estos tres híbridos de caféÀ etiopes a través de la embriogenesis somatica. El experimento se realizó en el Laboratorio de Biotecnología de plantas del JARC en los períodos entre septiembre 2005 y junio 2007. Se colectaron las hojas total mente desarrolladas y saludables sanitariamente en el invernadero con plántulas de café en crecimiento. Se pro baron diferentes medios basales y combinaciones de hormonas para la formación y proliferación del callo, la induccion de embriones somáticos, asi como el desarrollo y crecimiento del embrión. Se transfirieron plántulas in vitro teniendo de tres a cinco pares de hojas a la aclimatacion ex-vitro en bandejas IIenas de tierra esteril y cáscara de café bien descompuesta (1:1). La mejor respuesta de las hojas en las plántulas fueron las coleccionadas en los primero y segundo nudos (copa a la base) de las plántulas de cafe crecidas en el invernadero. El medio Murashige y Skoog 1962, complementado con 3mglL de 2,4-D y BA fue el mejor, con 90 a 100% de formación de callo, de los cuales del 45 a 50% son embriogénicos. EI medio de cultivo que contiene una combinacion de NAA (0,1 mglL) y Kinetin (0,5 mglL) reportó el numero más alto de embriones somáticos. EI uso de medios liquidos para el desarrollo del embrión somático demostró ser beneficioso reduciendo costo de producción de las plántulas y aumentando la proporción de desarrollo del embrión somático lo que revela perspectivas potenciales para la automatización de éstas técnicas.In the last two decades, breeders at Jimma Agricultural Research Center UARC), Ethiopia, had developed three arabica coffee hybrids: Aba Buna, Ghawe and MCH, that exhibited heterosis over their parents in most characters of economic and agronomic importance. The present study was designed with the objective of establishing regeneration protocols for these three Ethiopian coffee hybrids through somatic embryogenesis. The experiment was conducted at the plant biotechnology laboratory of jARC in the periods between September 2005 and june 2007. Healthy, actively growing and fully developed leaves having good sanitary condition and vigor were collected from green house raised coffee seedlings. Different basal media and hormone combinations were tested for callus formation and proliferation, somatic embryo induction, as well as embryo development and growth. In vitro rooted plantlets having 3 to 5 leaf pairs were transferred to ex-vitro acclimatization and hardening-off in seedling trays filled with sterile soil and well decomposed coffee husk (I: I). Best responding leaf explants were those collected from the first and second nodes (top to bottom) of green house grown coffee seedlings. Murashige and Skoog 1962 medium, supplemented with 3mglL of 2,4 - D and BA was the best, with 90 to 100% callus formation, of which 45 to 50% being embryogenic. Culture medium containing a combination of NAA (0,1 mglL) and Kinetin (0,5 mglL) gave the highest number of somatic embryos. The use of liquid media for somatic embryo development proved beneficial in reducing cost of plantlet production and increasing the rate of somatic embryo development, thereby revealing the potential prospects of the technique for future industrialization.CALLOCOFFEA ARABICACULTIVO DE TEJIDOSEMBRIOGENESIS SOMATICAEXPERIMENTACION EN LABORATORIOHIBRIDOSMICROPROPAGACIONREGENERACION IN VITROCafé Cacao (Cuba)

Regeneración de plantas a través de la embriogénesis somática en tres híbridos etíopes (ABA BUNA, GHAWE y MCH2) de Coffea arabica

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