A dose - dependent response to MEK inhibition determines hypoblast fate in bovine embryos

A dose - dependent response to MEK inhibition determines hypoblast fate in bovine embryos

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Fil: Canizo, Jesica R. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA Balcarce). Balcarce, Buenos Aires, Argentina.

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Main Authors: Canizo, Jesica R., Ynsaurralde Rivolta, Amada Eugenia, Vazquez Echegaray, Camila, Suvá, Mariana, Alberio, Virgilia, Aller Atucha, Juan Florencio, Guberman, Alejandra S., Salamone, Daniel Felipe, Alberio, Ricardo H., Alberio, Ramiro
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A dose - dependent response to MEK inhibition determines hypoblast fate in bovine embryos
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Buenos Aires, Argentina. Fil: Ynsaurralde Rivolta, Amada Eugenia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Laboratorio de Biotecnología Animal. Buenos Aires, Argentina. Fil: Ynsaurralde Rivolta, Amada Eugenia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Mercedes (EEA Mercedes). Mercedes, Corrientes, Argentina. Fil: Vazquez Echegaray, Camila. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica, Laboratorio de Regulación Génica en Células Madre. Buenos Aires, Argentina. Fil: Vazquez Echegaray, Camila. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica (IQUIBICEN). Buenos Aires, Argentina. Fil: Vazquez Echegaray, Camila. CONICET - Universidad de Buenos Aires. Instituto de Química Biológica (IQUIBICEN). Buenos Aires, Argentina. Fil: Suvá, Mariana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. Fil: Suvá, Mariana. CONICET - Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. Fil: Suvá, Mariana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Laboratorio de Biotecnología Animal. Buenos Aires, Argentina. Fil: Alberio, Virgilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. Fil: Alberio, Virgilia. CONICET - Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. Fil: Alberio, Virgilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Laboratorio de Biotecnología Animal. Buenos Aires, Argentina. Fil: Aller Atucha, Juan Florencio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA Balcarce). Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Fil: Guberman, Alejandra S. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica, Laboratorio de Regulación Génica en Células Madre. Buenos Aires, Argentina. Fil: Guberman, Alejandra S. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica (IQUIBICEN). Buenos Aires, Argentina. Fil: Guberman, Alejandra S. CONICET - Universidad de Buenos Aires. Instituto de Química Biológica (IQUIBICEN). Buenos Aires, Argentina. Fil: Guberman, Alejandra S. Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Fisiología y Biología Molecular y Celular. Buenos Aires, Argentina. Fil: Salamone, Daniel Felipe. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. Fil: Salamone, Daniel Felipe. CONICET - Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. Fil: Salamone, Daniel Felipe. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Laboratorio de Biotecnología Animal. Buenos Aires, Argentina. Fil: Alberio, Ricardo H. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA Balcarce). Balcarce, Buenos Aires, Argentina. Fil: Alberio, Ricardo H. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias. Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina. Fil: Alberio, Ramiro. University of Nottingham. School of Biosciences. Nottingham, UK. Background: The segregation of the hypoblast and the mergence of the pluripotent epiblast mark the final stages of blastocyst ormation in mammalian embryos. In bovine embryos the formation of the hypoblast has been partially studied, and evidence shows that MEK signalling plays a limited role in the segregation of this lineage. Here we explored the role of different signalling pathways during lineage segregation in the bovine embryo using immunofluorescence analysis of NANOG and SOX17 as readouts of epiblast and hypoblast, respectively. Results: We show that SOX17 starts to be expressed in 16–32-cell stage embryos, whereas NANOG is first detected from 8-cell stage. SOX17 is first co-expressed with NANOG, but these markers become mutually exclusive by the late blastocyst stage. By assessing the expression kinetics of NANOG/SOX17 we show that inhibition of MEK signalling can eliminate SOX17 expression in bovine blastocysts, without altering NANOG expression. Modulation of WNT, PKC and LIF did not affect NANOG expression in the epiblast when used in combination with the ERK inhibitor. Conclusions: This study shows that SOX17 can be used as a reliable early marker of hypoblast in the bovine, and based on its expression profile we show that the hypoblast segregates in day 7 blastocysts. Furthermore, SOX17 expression is abolished using 1 μM of PD0325901, without affecting the NANOG population in the epiblast. Modulation of WNT, PKC and LIF are not sufficient to support enhanced NANOG expression in the epiblast when combined with ERK inhibitor, indicating that additional signalling pathways should be examined to determine their potential roles in epiblast expansion. tbls., grafs., fot. application/pdf 10.1186/s12861-019-0193-9 http://ri.agro.uba.ar/greenstone3/library/collection/arti/document/2019canizo eng info:eu-repo/semantics/openAccess openAccess http://ri.agro.uba.ar/greenstone3/library/page/biblioteca#section4 Developmental Biology Vol.19 1-13 https://bmcdevbiol.biomedcentral.com/ HYPOBLAST EPIBLAST SOX17 NANOG BOVINE EMBRYOS LINEAGE SEGREGATION PD0325901 LIF T2IGÖ WNT INHIBITOR A dose - dependent response to MEK inhibition determines hypoblast fate in bovine embryos article info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion publishedVersion

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