Viperina, un factor de restricción en la infección con el arenavirus Junín

Viperina (VIP) es una proteína cuya expresión es inducida por interferón (IFN) y se ha reportadocomo factor de restricción viral de diversos virus. En el presente trabajo se analizó por primera vezla acción antiviral de viperina en células A549 sobre la multiplicación del virus Junín (JUNV). Asimismo, se analizó la importancia de las estructuras lipídicas en el ciclo de mutiplicación de JUNV y la localización subcelular en la cual VIP ejerce su acción antiviral. Mediante distintosensayos se pudo comprobar que la respuesta de IFN/VIP se encuentra activada en las células A549infectadas con JUNV. Del análisis de sobreexpresión de VIP se confirmó que esta proteína tiene unefecto antiviral sobre la multiplicación de JUNV. Cabe destacar que los aumentos de los nivelesrelativos de mRNAs/proteínas VIP encontrados se correlacionan con la progresión de la infeccióncon JUNV. Interesantemente, las estructuras lipídicas denominadas lipid droplets (LDs) seobservaron aumentadas tanto en número como en tamaño en los cultivos infectados con JUNV. Por otro lado, la disminución de los LDs afectó negativamente la producción de virionesextracelulares, y las imágenes de microscopía revelaron que en las células infectadas lasnucleoproteínas virales se encuentran cerca de los LDs, lo que sugiere que los complejos dereplicación de JUNV podrían estar utilizando estas estructuras. Por último, los estudios delocalización en membrana plasmática de las glicoproteínas virales sugieren que la acción de VIP nosería directamente en membrana pero sí podría ser a través de un paso previo relacionado con eltransporte de glicoproteínas a microdominios rafts. En su conjunto, estos resultados no solamenteincrementan el conocimiento sobre la biología del arenavirus Junín, sino que ofrece un nuevoblanco para la intervención del ciclo de replicación y la búsqueda de agentes quimioterapéuticosespecíficos.

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Main Author: Peña Cárcamo, José Rafael
Other Authors: García, Cybele
Format: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis biblioteca
Language:spa
Published: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Subjects:VIPERINA, INTERFERON, VIRUS JUNIN, LIPID DROPLETS, ANTIVIRAL, VIPERIN, JUNIN VIRUS, HEMORRHAGIC FEVER,
Online Access:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5925_PenaCarcamo
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Viperina, un factor de restricción en la infección con el arenavirus Junín
description Viperina (VIP) es una proteína cuya expresión es inducida por interferón (IFN) y se ha reportadocomo factor de restricción viral de diversos virus. En el presente trabajo se analizó por primera vezla acción antiviral de viperina en células A549 sobre la multiplicación del virus Junín (JUNV). Asimismo, se analizó la importancia de las estructuras lipídicas en el ciclo de mutiplicación de JUNV y la localización subcelular en la cual VIP ejerce su acción antiviral. Mediante distintosensayos se pudo comprobar que la respuesta de IFN/VIP se encuentra activada en las células A549infectadas con JUNV. Del análisis de sobreexpresión de VIP se confirmó que esta proteína tiene unefecto antiviral sobre la multiplicación de JUNV. Cabe destacar que los aumentos de los nivelesrelativos de mRNAs/proteínas VIP encontrados se correlacionan con la progresión de la infeccióncon JUNV. Interesantemente, las estructuras lipídicas denominadas lipid droplets (LDs) seobservaron aumentadas tanto en número como en tamaño en los cultivos infectados con JUNV. Por otro lado, la disminución de los LDs afectó negativamente la producción de virionesextracelulares, y las imágenes de microscopía revelaron que en las células infectadas lasnucleoproteínas virales se encuentran cerca de los LDs, lo que sugiere que los complejos dereplicación de JUNV podrían estar utilizando estas estructuras. Por último, los estudios delocalización en membrana plasmática de las glicoproteínas virales sugieren que la acción de VIP nosería directamente en membrana pero sí podría ser a través de un paso previo relacionado con eltransporte de glicoproteínas a microdominios rafts. En su conjunto, estos resultados no solamenteincrementan el conocimiento sobre la biología del arenavirus Junín, sino que ofrece un nuevoblanco para la intervención del ciclo de replicación y la búsqueda de agentes quimioterapéuticosespecíficos.
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spelling oai:RDI UBA:aextesis:tesis_n5925_PenaCarcamo_oai2023-04-26 García, Cybele Cordo, Sandra Peña Cárcamo, José Rafael 2016-03-23 Viperina (VIP) es una proteína cuya expresión es inducida por interferón (IFN) y se ha reportadocomo factor de restricción viral de diversos virus. En el presente trabajo se analizó por primera vezla acción antiviral de viperina en células A549 sobre la multiplicación del virus Junín (JUNV). Asimismo, se analizó la importancia de las estructuras lipídicas en el ciclo de mutiplicación de JUNV y la localización subcelular en la cual VIP ejerce su acción antiviral. Mediante distintosensayos se pudo comprobar que la respuesta de IFN/VIP se encuentra activada en las células A549infectadas con JUNV. Del análisis de sobreexpresión de VIP se confirmó que esta proteína tiene unefecto antiviral sobre la multiplicación de JUNV. Cabe destacar que los aumentos de los nivelesrelativos de mRNAs/proteínas VIP encontrados se correlacionan con la progresión de la infeccióncon JUNV. Interesantemente, las estructuras lipídicas denominadas lipid droplets (LDs) seobservaron aumentadas tanto en número como en tamaño en los cultivos infectados con JUNV. Por otro lado, la disminución de los LDs afectó negativamente la producción de virionesextracelulares, y las imágenes de microscopía revelaron que en las células infectadas lasnucleoproteínas virales se encuentran cerca de los LDs, lo que sugiere que los complejos dereplicación de JUNV podrían estar utilizando estas estructuras. Por último, los estudios delocalización en membrana plasmática de las glicoproteínas virales sugieren que la acción de VIP nosería directamente en membrana pero sí podría ser a través de un paso previo relacionado con eltransporte de glicoproteínas a microdominios rafts. En su conjunto, estos resultados no solamenteincrementan el conocimiento sobre la biología del arenavirus Junín, sino que ofrece un nuevoblanco para la intervención del ciclo de replicación y la búsqueda de agentes quimioterapéuticosespecíficos. Viperin (VIP) is a cellular protein induced by interferon (IFN) reported as restriction factor forseveral viruses. In the present work and for the first time it has been analyzed viperin antiviralaction in A549 cells infected with Junín virus (JUNV). The importance of cellular lipidic structures in JUNV multiplication and putative subcellular localization where VIP action could take place, werealso studied. Different assays showed that IFN/VIP response is activated in A549 cells upon JUNVinfection. Overexpression of VIP showed to exert a strong antiviral effect on JUNV multiplication. In this line relative amounts of mRNA/protein levels correlate with the progression of JUNVinfection. Interestingly, lipid droplets structures (LDs) in infected cells were augmented both innumbers and size. Accordingly diminished of LDs negatively affected extracellular virionproduction. Microscopy analysis revealed viral nucleoproteins close to LDs, suggesting that viralreplication complexes may make use of these structures. Finally, immunofluorescense assays andlocalization studies showed that the viral glycoproteins is almost absent from plasma membranesuggesting that VIP action might be exerted in an indirect fashion through lipids rafts negativemodulation. All together these results enlighten the knowledge about the biology of thearenaviruses and additionally reveal a very new and interesting target for the intervention designand screening of specific chemotherapeutic agents to combat JUNV. Fil: Peña Cárcamo, José Rafael. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5925_PenaCarcamo spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar VIPERINA INTERFERON VIRUS JUNIN LIPID DROPLETS ANTIVIRAL VIPERIN INTERFERON JUNIN VIRUS HEMORRHAGIC FEVER ANTIVIRAL Viperina, un factor de restricción en la infección con el arenavirus Junín Viperin, a restriction factor in Junin arenavirus infection info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n5925_PenaCarcamo_oai