Niveles de ploidía, morfología y germinación de semillas en especies del género opuntia del sureste de Coahuila
"El género Opuntia pertenece a la familia Cactaceae, en México se concentra una amplia diversidad del género y actualmente son reconocidas 93 especies silvestres de las cuales 12 se distribuyen en Coahuila. Debido a su capacidad de adaptación en altas temperaturas y falta de agua, es uno de los recursos fitogenéticos de mayor relevancia en las zonas áridas y semiáridas. El nopal ejerce un papel importante como recurso económico de la flora mexicana; se reportan más de 20 usos entre alimenticios, medicinales, forrajeros y ecológicos. El objetivo principal en la presente investigación fue determinar el número cromosómico, niveles de ploidía, caracterización morfológica y germinación de semillas de siete especies del género Opuntia que se distribuyen en el sureste de Coahuila. Se realizaron colectas de las siete especies (O. durangensis, O. engelmannii, O. ficus-indica, O. megacantha, O. microdasys, O. rastrera y O. stenopetala) en cinco minicipios del sureste de Coahuila (Arteaga, Saltillo, Ramos Arizpe, General Cepeda y Parras) para la obtención del material vegetal (cladodios, botones florales y frutos). La investigacion se desarrollo en dos etapas, la primera se enfoco a análisis citogeneticos y la segunda a los análisis morfo-fisiológicos de las semillas. Para obtener el número cromosomico, nivel de ploídia de siete especies y el analisis del cariotipo de O. microdasys se aplicaron tecnicas citogenéticas en ápices radiculares, previamente estandarizadas para nopal. Para citometría de flujo (CF) también se estandarizo la técnica, con el objetivo de determinar el valor C y corroborar el nivel de ploidía en O. microdasys, O. rastrera y O. megacantha. Para germinación, las semillas de las diferentes especies se establecieron con 23 tratamientos pregerminativos y cuatro repeticiones, 16 fueron colocados en peat moss más perlita y 7 en medio de germinación in vitro, las variables evaluadas fueron porcentaje de germinación (GP) y velocidad de emergencia (VE). Se realizó análisis exploratorios basados en parcelas, se aplicó modelos lineales generalizados para datos de proporción con factores explicativos categóricos. En la caracterización morfológica de semillas, se utilizó la técnica de desgaste y análisis de imágenes, se evaluaron variables internas: grosor de testa (GT), grosor de la cubierta funicular ventral (GCFV), longitud del embrión (LE) y área del embrión (AE); y externas: longitud del eje mayor (LEMA) y del eje menor (LEME). Se efectuaron análisis exploratorios, de varianza y de componentes principales para detectar variables sobresalientes. Los resultados del conteo cromosómico en las siete especies de Opuntia revelaron diferentes niveles de ploidía de acuerdo con el número básico reportado para este género de x=11, abarcan desde diploides (2n=22) para O. microdasys y O. stenopetala, tetraploides (2n=44) para O. durangensis y O. rastrera, hasta octaploides (2n=88) para O. ficus-indica y O. megacantha, para estas seis especies no se encontraron diferencias entre localidades; sin embargo, para O. engelmannii se observaron dos niveles hexaploide (2n=66) y octaploide (2n=88). El cariotipo de O. microdasys es simétrico, caracterizado por la presencia de cromosomas metacéntricos y submetacéntricos (10m + 1sm). En citometría de flujo el contenido promedio de 2C-ADN varió de 4.11 a 3.33 pg para O. microdasys (diploide) y de 3.52 a 4.29 pg para O. rastrera (tetraploide), mientras que para O. megacantha (octaploide) fue de 5.33 a 7.02 pg. Los coeficientes de variación (CV) para los picos G1 en todas las especies fueron <9%. En el análisis de semillas se observaron diferencias altamente significativas entre especies y tratamientos. En O. engelmannii, O. microdasys y O. stenopetala los porcentajes de germinación fueron de 82.5%, 67.5% y 87.5% respectivamente con semillas lijadas más remojo en peróxido de hidrogeno (H2O2) al 3% por 24 horas, mientras que en O. rastrera el porcentaje de germinación acumulado fue de 87.5% con semilla lijada. O. megacantha y O. ficus-indica obtuvieron porcentajes de 100% y 82.5% con remojo en H2O2 al 3% por 24 horas. Los tratamientos con escarificación inducen mayor velocidad de emergencia desde los primeros seis días de incubación en las especies evaluada. Por otro lado, en la caracterización morfológica de semillas se encontraron diferencias altamente significativas entre especies para todas las variables, siendo O. ficus-indica la que presenta semillas con mayor tamaño de testa y embrión mientras que O. engelmanni y O. microdasys presentan semillas muy pequeñas. Existe correlación positiva entre las variables LE y AE. El análisis de componentes principales representó el 92% de la variación sobre los dos primeros ejes en donde las variables más influyentes para el primer componente, fueron LEMA, LEME, GT, AEM, LE; y el segundo se relacionó con la variable GCFV. Estos resultados contribuyen a la ordenación del género, así como en el mejoramiento genético en nopal y en la generación de estrategias de conservación in situ y ex situ."
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Nopal cromosomas semilla CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA Nopal cromosomas semilla CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA González Cortés, Areli Niveles de ploidía, morfología y germinación de semillas en especies del género opuntia del sureste de Coahuila |
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"El género Opuntia pertenece a la familia Cactaceae, en México se concentra una amplia diversidad del género y actualmente son reconocidas 93 especies silvestres de las cuales 12 se distribuyen en Coahuila. Debido a su capacidad de adaptación en altas temperaturas y falta de agua, es uno de los recursos fitogenéticos de mayor relevancia en las zonas áridas y semiáridas. El nopal ejerce un papel importante como recurso económico de la flora mexicana; se reportan más de 20 usos entre alimenticios, medicinales, forrajeros y ecológicos. El objetivo principal en la presente investigación fue determinar el número cromosómico, niveles de ploidía, caracterización morfológica y germinación de semillas de siete especies del género Opuntia que se distribuyen en el sureste de Coahuila. Se realizaron colectas de las siete especies (O. durangensis, O. engelmannii, O. ficus-indica, O. megacantha, O. microdasys, O. rastrera y O. stenopetala) en cinco minicipios del sureste de Coahuila (Arteaga, Saltillo, Ramos Arizpe, General Cepeda y Parras) para la obtención del material vegetal (cladodios, botones florales y frutos). La investigacion se desarrollo en dos etapas, la primera se enfoco a análisis citogeneticos y la segunda a los análisis morfo-fisiológicos de las semillas. Para obtener el número cromosomico, nivel de ploídia de siete especies y el analisis del cariotipo de O. microdasys se aplicaron tecnicas citogenéticas en ápices radiculares, previamente estandarizadas para nopal. Para citometría de flujo (CF) también se estandarizo la técnica, con el objetivo de determinar el valor C y corroborar el nivel de ploidía en O. microdasys, O. rastrera y O. megacantha. Para germinación, las semillas de las diferentes especies se establecieron con 23 tratamientos pregerminativos y cuatro repeticiones, 16 fueron colocados en peat moss más perlita y 7 en medio de germinación in vitro, las variables evaluadas fueron porcentaje de germinación (GP) y velocidad de emergencia (VE). Se realizó análisis exploratorios basados en parcelas, se aplicó modelos lineales generalizados para datos de proporción con factores explicativos categóricos. En la caracterización morfológica de semillas, se utilizó la técnica de desgaste y análisis de imágenes, se evaluaron variables internas: grosor de testa (GT), grosor de la cubierta funicular ventral (GCFV), longitud del embrión (LE) y área del embrión (AE); y externas: longitud del eje mayor (LEMA) y del eje menor (LEME). Se efectuaron análisis exploratorios, de varianza y de componentes principales para detectar variables sobresalientes.
Los resultados del conteo cromosómico en las siete especies de Opuntia revelaron diferentes niveles de ploidía de acuerdo con el número básico reportado para este género de x=11, abarcan desde diploides (2n=22) para O. microdasys y O. stenopetala, tetraploides (2n=44) para O. durangensis y O. rastrera, hasta octaploides (2n=88) para O. ficus-indica y O. megacantha, para estas seis especies no se encontraron diferencias entre localidades; sin embargo, para O. engelmannii se observaron dos niveles hexaploide (2n=66) y octaploide (2n=88). El cariotipo de O. microdasys es simétrico, caracterizado por la presencia de cromosomas metacéntricos y submetacéntricos (10m + 1sm). En citometría de flujo el contenido promedio de 2C-ADN varió de 4.11 a 3.33 pg para O. microdasys (diploide) y de 3.52 a 4.29 pg para O. rastrera (tetraploide), mientras que para O. megacantha (octaploide) fue de 5.33 a 7.02 pg. Los coeficientes de variación (CV) para los picos G1 en todas las especies fueron <9%.
En el análisis de semillas se observaron diferencias altamente significativas entre especies y tratamientos. En O. engelmannii, O. microdasys y O. stenopetala los porcentajes de germinación fueron de 82.5%, 67.5% y 87.5% respectivamente con semillas lijadas más remojo en peróxido de hidrogeno (H2O2) al 3% por 24 horas, mientras que en O. rastrera el porcentaje de germinación acumulado fue de 87.5% con semilla lijada. O. megacantha y O. ficus-indica obtuvieron porcentajes de 100% y 82.5% con remojo en H2O2 al 3% por 24 horas. Los tratamientos con escarificación inducen mayor velocidad de emergencia desde los primeros seis días de incubación en las especies evaluada. Por otro lado, en la caracterización morfológica de semillas se encontraron diferencias altamente significativas entre especies para todas las variables, siendo O. ficus-indica la que presenta semillas con mayor tamaño de testa y embrión mientras que O. engelmanni y O. microdasys presentan semillas muy pequeñas. Existe correlación positiva entre las variables LE y AE. El análisis de componentes principales representó el 92% de la variación sobre los dos primeros ejes en donde las variables más influyentes para el primer componente, fueron LEMA, LEME, GT, AEM, LE; y el segundo se relacionó con la variable GCFV. Estos resultados contribuyen a la ordenación del género, así como en el mejoramiento genético en nopal y en la generación de estrategias de conservación in situ y ex situ." |
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dig-uaaan-mx-123456789-462712019-10-10T08:12:40Z Niveles de ploidía, morfología y germinación de semillas en especies del género opuntia del sureste de Coahuila González Cortés, Areli Acceso Abierto CC BY-NC-ND - Atribución-NoComercial-SinDerivadas Nopal cromosomas semilla CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA "El género Opuntia pertenece a la familia Cactaceae, en México se concentra una amplia diversidad del género y actualmente son reconocidas 93 especies silvestres de las cuales 12 se distribuyen en Coahuila. Debido a su capacidad de adaptación en altas temperaturas y falta de agua, es uno de los recursos fitogenéticos de mayor relevancia en las zonas áridas y semiáridas. El nopal ejerce un papel importante como recurso económico de la flora mexicana; se reportan más de 20 usos entre alimenticios, medicinales, forrajeros y ecológicos. El objetivo principal en la presente investigación fue determinar el número cromosómico, niveles de ploidía, caracterización morfológica y germinación de semillas de siete especies del género Opuntia que se distribuyen en el sureste de Coahuila. Se realizaron colectas de las siete especies (O. durangensis, O. engelmannii, O. ficus-indica, O. megacantha, O. microdasys, O. rastrera y O. stenopetala) en cinco minicipios del sureste de Coahuila (Arteaga, Saltillo, Ramos Arizpe, General Cepeda y Parras) para la obtención del material vegetal (cladodios, botones florales y frutos). La investigacion se desarrollo en dos etapas, la primera se enfoco a análisis citogeneticos y la segunda a los análisis morfo-fisiológicos de las semillas. Para obtener el número cromosomico, nivel de ploídia de siete especies y el analisis del cariotipo de O. microdasys se aplicaron tecnicas citogenéticas en ápices radiculares, previamente estandarizadas para nopal. Para citometría de flujo (CF) también se estandarizo la técnica, con el objetivo de determinar el valor C y corroborar el nivel de ploidía en O. microdasys, O. rastrera y O. megacantha. Para germinación, las semillas de las diferentes especies se establecieron con 23 tratamientos pregerminativos y cuatro repeticiones, 16 fueron colocados en peat moss más perlita y 7 en medio de germinación in vitro, las variables evaluadas fueron porcentaje de germinación (GP) y velocidad de emergencia (VE). Se realizó análisis exploratorios basados en parcelas, se aplicó modelos lineales generalizados para datos de proporción con factores explicativos categóricos. En la caracterización morfológica de semillas, se utilizó la técnica de desgaste y análisis de imágenes, se evaluaron variables internas: grosor de testa (GT), grosor de la cubierta funicular ventral (GCFV), longitud del embrión (LE) y área del embrión (AE); y externas: longitud del eje mayor (LEMA) y del eje menor (LEME). Se efectuaron análisis exploratorios, de varianza y de componentes principales para detectar variables sobresalientes. Los resultados del conteo cromosómico en las siete especies de Opuntia revelaron diferentes niveles de ploidía de acuerdo con el número básico reportado para este género de x=11, abarcan desde diploides (2n=22) para O. microdasys y O. stenopetala, tetraploides (2n=44) para O. durangensis y O. rastrera, hasta octaploides (2n=88) para O. ficus-indica y O. megacantha, para estas seis especies no se encontraron diferencias entre localidades; sin embargo, para O. engelmannii se observaron dos niveles hexaploide (2n=66) y octaploide (2n=88). El cariotipo de O. microdasys es simétrico, caracterizado por la presencia de cromosomas metacéntricos y submetacéntricos (10m + 1sm). En citometría de flujo el contenido promedio de 2C-ADN varió de 4.11 a 3.33 pg para O. microdasys (diploide) y de 3.52 a 4.29 pg para O. rastrera (tetraploide), mientras que para O. megacantha (octaploide) fue de 5.33 a 7.02 pg. Los coeficientes de variación (CV) para los picos G1 en todas las especies fueron <9%. En el análisis de semillas se observaron diferencias altamente significativas entre especies y tratamientos. En O. engelmannii, O. microdasys y O. stenopetala los porcentajes de germinación fueron de 82.5%, 67.5% y 87.5% respectivamente con semillas lijadas más remojo en peróxido de hidrogeno (H2O2) al 3% por 24 horas, mientras que en O. rastrera el porcentaje de germinación acumulado fue de 87.5% con semilla lijada. O. megacantha y O. ficus-indica obtuvieron porcentajes de 100% y 82.5% con remojo en H2O2 al 3% por 24 horas. Los tratamientos con escarificación inducen mayor velocidad de emergencia desde los primeros seis días de incubación en las especies evaluada. Por otro lado, en la caracterización morfológica de semillas se encontraron diferencias altamente significativas entre especies para todas las variables, siendo O. ficus-indica la que presenta semillas con mayor tamaño de testa y embrión mientras que O. engelmanni y O. microdasys presentan semillas muy pequeñas. Existe correlación positiva entre las variables LE y AE. El análisis de componentes principales representó el 92% de la variación sobre los dos primeros ejes en donde las variables más influyentes para el primer componente, fueron LEMA, LEME, GT, AEM, LE; y el segundo se relacionó con la variable GCFV. Estos resultados contribuyen a la ordenación del género, así como en el mejoramiento genético en nopal y en la generación de estrategias de conservación in situ y ex situ." "Opuntia genus belongs to Cactaceae family. Mexico has a broad diversity of this genus. Currently, there are 93 wild species and 12 of them are in Coahuila. Due to Opuntia’s adaptation capacity to high temperatures and lack of water, it is one of the most relevant phytogenetic resources in arid and semiarid regions. Prickly pear cactus plays an important role as economic resource among Mexican fauna, with more than 20 uses, including food source, medicinal use, animal feed and ecological use. The main purpose of this research work was determining the chromosome number, ploidy levels, morphological characterization and seed germination in seven species of Opuntia genus that are distributed in the Southeast of Coahuila. Seven species were collected (O. durangensis, O. engelmannii, O. ficus-indica, O. megacantha, O. microdasys, O. rastrera and O. stenopetala) in five municipalities of Coahuila’s Southeast, (Arteaga, Saltillo, Ramos Arizpe, General Cepeda and Parras), in order to obtain the plant material (cladodes, flowery buds and fruits). The research had to parts; the first part focused on citogenetic analysis, while the second part focused on morpho-physiological seed analysis. In order to obtain the chromosome number, the ploidy level and the karyotype of O. microdasys, we applied citogenetic techniques on root tips that were previously standaridized for Opuntia. The flow cytometry technique (CF) was also standardized in order to find C value and confirm ploidy level in O. microdasys, O. rastrera and O. megacantha. With regards to germination, the seeds of different species were established using 23 pre-germinating treatments and four replicates. 16 were placed in peat moss plus perlite and 7 were grown in vitro. We assessed the germination percentage (GP) and the speed of emergence (VE) variables. Plot-based exploratory tests were conducted, with general linear models for proportional data with categorical explanatory factors. We used the attrition technique and imaging analysis to conduct the morphological characterization of seeds, assessing internal variables: seed coat thickness (GT), ventral funicular coat thickness (GCFV), embryo’s length (LE) and embryo’s area (AE); as well as external variables: length of the major axis (LEMA) and length of the minor axis (LEME). We did exploratory, variance and main component analysis to detect the outstanding variables. Results of the chromosome counting in the seven Opuntia species revealed different levels of ploidy, as compared to the basic number reported for this genus: x=11. Ploidy levels included diploids (2n=22) for O. microdasys and O. stenopetala, tetraploids (2n=44) for O. durangensis and O. rastrera; as well as octaploids (2n=88) for O. ficus-indica and O. megacantha. There were no differences in these six species from different localities. However, for O. engelmannii we found two levels: hexaploids (2n=66) and octaploids (2n=88). The karyotype of O. microdasys is symmetrical and usually has the presence of metacentric and sub-metacentric chromosomes (10m + 1sm). In flow cytometry the average content of 2C-DNA varied from 4.11 to 3.33 pg for O. microdasys (diploid) and from 3.52 to 4.29 pg for O. rastrera (tetraploid); while for O. megacantha (octaploid), the results ranged from 5.33 to 7.02 pg. The variation coefficients (CV) for G1 peaks in all the species, were <9%. Seed test results showed highly significant differences among species and treatments. In O. engelmannii, O. microdasys and O. stenopetala the germination percentages were 82.5%, 67.5% y 87.5% respectively, with sanded seeds that were soaked in hydrogen peroxide (H2O2) at 3% during 24 hours; while in O. rastrera the cumulative germination percentage was 87.5% with sanded seeds. O. megacantha and O. ficus-indica obtained percentages of 100% and 82.5%, after soaking in H2O2 at 3% during 24 hours. Sanding treatments induced faster emergence, since the first six days of incubation in the test species. On the other hand, seed morphological characterization showed highly significant differences among the species for all the variables. O. ficus-indica had the biggest seed coats and the biggest embryos; while O. engelmanni and O. microdasys have very small seeds. There is a positive correlation among LE and AE variables. The main component analysis represented 92% of the variation in the two first axis, where the most influencing variables for the first component were LEMA, LEME, GT, AEM, LE; and variable GCFV influenced the second component. These results contributed to establishing the genus order, as well as to Opuntia’s breeding and the development of in situ and ex situ conservation strategies." Ramirez Godina, Francisca Reyes Valdés, Manuel Humberto Robledo Torres, Valentín Pérez Rodríguez, Miguel Ángel López Benítez, Alfonso 2019-06-09 Tesis de doctorado Versión publicada PDF http://repositorio.uaaan.mx:8080/xmlui/handle/123456789/46271 Español Estudiantes Investigadores |