L'interférence ARN pour lutter contre les séquences pararétrovirales endogènes des bananiers

Le Banana streak virus ou BSV, responsable de la mosaïque en tirets des bananiers est la contrainte majeure de la filière banane du fait de la présence de séquences virales endogènes au génome bananier. Ces bananiers d'apparence saine, sous l'action d'un stress se révèlent infectés, exprimant le virus et la maladie. Une approche ARN interférant (ARNi) basée sur le blocage du promoteur BSV a été initiée afin de stopper toute possibilité de multiplication virale tant à partir du virus que des séquences endogènes. Ainsi une construction constituée d'une région de 332pb de la zone promoteur du BSV souche Obino l'Ewai (BSV-Ol) sens et antisens séparée par un intron a été obtenue. Elle a été mise sous le contrôle du promoteur du CaMV 35S et d'un signal PolyA permettant la restitution d'ARN double brins type "hairpin" aberrants. Cette construction a été ensuite bombardée sur des feuilles de bananier cavendish (AAA) agés de 10 jours ne possédant pas d'EPRV BSV et présentant une infection BSV-Ol. La diminution de la multiplication virale attendue a été suivie par PCR et IC-PCR semi quantitative sur la feuille bombardée et toute nouvelle feuille émise pendant 3 semaines. La technique de bombardement sur bananier a été adaptée en utilisant le gène rapporteur de la GFP. Les premiers résultats montrent une diminution significative de la multiplication virale dans un faible nombre de bananiers bombardés par PCR semi quantitative. Les autres analyses sont en cours de traitement. (Texte intégral)