Determinação da temperatura de anelamento com marcadores ISSR em acessos de pinhão-manso.
O pinhão-manso (Jatropha curcas L.) é uma espécie perene, monóica que pertence à família das Euforbiáceas. Essa planta está sendo implantada em diversas regiões do Brasil, sendo que os genótipos usados nos plantios são geneticamente desconhecidos, tornando-se assim necessário um estudo de modo mais detalhado desta espécie, principalmente no âmbito molecular. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo determinar temperaturas de anelamento em 15 primers ISSR. Foram coletadas folhas jovens de pinhão-manso oriundos do Banco de Germoplasma da Embrapa Meio-Norte, sendo utilizados os acessos CMN 102, CMN 325, CMN 327, NP e J. As reações de amplificação foram preparadas em volume final de 20 μL, sendo os produtos amplificados separados em gel de agarose (1,5%) conduzido a 80 V por 5 horas, corado com GelRed TM 10.000 × (Uniscience) e fotodocumentados sob luz ultravioleta. Foram observados produtos de amplificação com número e intensidade de bandas satisfatória para 10 dos 15 primers ISSR, em que a Tm variou de 47,4 a 52,4 ºC. Obteve-se boa amplificação, no entanto, primers com Tm inferiores a 30ºC podem comprometer a determinação de temperatura de anelamento.
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2013-03-14
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O pinhão-manso (Jatropha curcas L.) é uma espécie perene, monóica que pertence à família das Euforbiáceas. Essa planta está sendo implantada em diversas regiões do Brasil, sendo que os genótipos usados nos plantios são geneticamente desconhecidos, tornando-se assim necessário um estudo de modo mais detalhado desta espécie, principalmente no âmbito molecular. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo determinar temperaturas de anelamento em 15 primers ISSR. Foram coletadas folhas jovens de pinhão-manso oriundos do Banco de Germoplasma da Embrapa Meio-Norte, sendo utilizados os acessos CMN 102, CMN 325, CMN 327, NP e J. As reações de amplificação foram preparadas em volume final de 20 μL, sendo os produtos amplificados separados em gel de agarose (1,5%) conduzido a 80 V por 5 horas, corado com GelRed TM 10.000 × (Uniscience) e fotodocumentados sob luz ultravioleta. Foram observados produtos de amplificação com número e intensidade de bandas satisfatória para 10 dos 15 primers ISSR, em que a Tm variou de 47,4 a 52,4 ºC. Obteve-se boa amplificação, no entanto, primers com Tm inferiores a 30ºC podem comprometer a determinação de temperatura de anelamento. |
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