Estandarización del inmunoensayo ELISA para la detección de IgG anti-Toxoplasma gondii en ratón
Se describe la estandarización de un inmunoensayo (ELISA) para la detección de IgG contra Toxoplasma gondii en ratones. Este ensayo tiene interés como herramienta en el estudio de cepas y en el diagnostico de la toxoplasmosis en muestras de origen humano. Se determinaron las mejores condiciones para la realización de la prueba (diferentes agentes bloqueadores y diferentes concentraciones de antígeno). No hubo diferencia significativa en cuanto a la función de los agentes bloqueadores, por lo que se decidió trabajar con tampón de recubrimiento con albúmina bovina al 1%. El valor óptimo de concentración de antígeno fue 20 µg/ml, para el conjugado la dilución óptima fue de 1:1.000. El punto de corte fue estimado como el promedio de los sueros negativos más dos desviaciones estándar (0,135). Todos los sueros negativos presentaron valores de absorbancia a 410 nm menores al punto de corte. No se encontraron diferencias para la detección entre cepas de T. gondii. Los resultados muestran que la prueba ELISA es altamente sensible y especifica y es de gran utilidad para la optimización de los procedimientos que se realizan en animales de laboratorio
| Main Authors: | , , |
|---|---|
| Format: | Digital revista |
| Language: | Spanish / Castilian |
| Published: |
Sociedad Chilena de Parasitología
2005
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| Online Access: | http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-77122005000100019 |
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| Summary: | Se describe la estandarización de un inmunoensayo (ELISA) para la detección de IgG contra Toxoplasma gondii en ratones. Este ensayo tiene interés como herramienta en el estudio de cepas y en el diagnostico de la toxoplasmosis en muestras de origen humano. Se determinaron las mejores condiciones para la realización de la prueba (diferentes agentes bloqueadores y diferentes concentraciones de antígeno). No hubo diferencia significativa en cuanto a la función de los agentes bloqueadores, por lo que se decidió trabajar con tampón de recubrimiento con albúmina bovina al 1%. El valor óptimo de concentración de antígeno fue 20 µg/ml, para el conjugado la dilución óptima fue de 1:1.000. El punto de corte fue estimado como el promedio de los sueros negativos más dos desviaciones estándar (0,135). Todos los sueros negativos presentaron valores de absorbancia a 410 nm menores al punto de corte. No se encontraron diferencias para la detección entre cepas de T. gondii. Los resultados muestran que la prueba ELISA es altamente sensible y especifica y es de gran utilidad para la optimización de los procedimientos que se realizan en animales de laboratorio |
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