Mantenimiento en cultivo y caracterización de un microsporidio (Encephalitozoon hellem) aislado en un paciente con Sida y neumonía

Comunicamos la identificación, a nivel de especie, de un microsporidio aislado en cultivo celular a partir de un lavado broncoalveolar de un paciente con Sida y neumonía. La caracterización del aislado se realizó mediante: 1) estudio morfológico utilizando métodos de microscopía óptica y electrónica, 2) estudio inmunológico con antisueros específicos, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (WB) y 3) estudio molecular tras reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con iniciadores especie-específicos diseñados a partir de la región que codifica la subunidad menor del ARN ribosomal. Las características ultraestructurales del aislado permitieron su identificación en el género Encephalitozoon. La identificación específica del microsporidio como Encephalito-zoon hellem se realizó mediante IFI y WB, empleando suero policlonal de conejo anti-E. hellem (CDC:0291:V213), y mediante la amplificación por PCR del fragmento diagnóstico utilizando el par de iniciadores EHELF/EHELR específicos para esta especie. El aislado ha sido denominado EHVS-96 y se mantiene en cultivo continuo en células Vero-E6. Este es el primer aislamiento en cultivo y caracterización de E. hellem en España.

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Main Authors: BORNAY-LLINARES,FERNANDO J., ACOSTA,BEATRIZ, PEMAN,JAVIER, MOURA,HERCULES, SCHWARTZ,DAVID A., DA SILVA,ALEXANDRE J., VISVESVARA,GOVINDA S., FIGUERAS,MARIA J., GOBERNADO,MIGUEL, PIENIAZEK,NORMAN J.
Format: Digital revista
Language:Spanish / Castilian
Published: Sociedad Chilena de Parasitología.Federación Latinoamericana de Parasitología 2000
Online Access:http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-07202000000300001
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Summary:Comunicamos la identificación, a nivel de especie, de un microsporidio aislado en cultivo celular a partir de un lavado broncoalveolar de un paciente con Sida y neumonía. La caracterización del aislado se realizó mediante: 1) estudio morfológico utilizando métodos de microscopía óptica y electrónica, 2) estudio inmunológico con antisueros específicos, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (WB) y 3) estudio molecular tras reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con iniciadores especie-específicos diseñados a partir de la región que codifica la subunidad menor del ARN ribosomal. Las características ultraestructurales del aislado permitieron su identificación en el género Encephalitozoon. La identificación específica del microsporidio como Encephalito-zoon hellem se realizó mediante IFI y WB, empleando suero policlonal de conejo anti-E. hellem (CDC:0291:V213), y mediante la amplificación por PCR del fragmento diagnóstico utilizando el par de iniciadores EHELF/EHELR específicos para esta especie. El aislado ha sido denominado EHVS-96 y se mantiene en cultivo continuo en células Vero-E6. Este es el primer aislamiento en cultivo y caracterización de E. hellem en España.