Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI), está presente en los espermatozoides humanos y regula la actividad de proacrosina
SLPI (del inglés Secretory Leukocyte Protease Inhibitor) es una proteína catiónica no glicosilada de 11,7KDa con potente actividad inhibidora de proteasas. Su presencia ha sido detectada en tejidos (epidídimo/próstata/vesículas seminales/útero/trompas de Fallopio) y fluidos (plasma seminal/moco cervical) del tracto reproductor. Sin embargo, su expresión en la gónada masculina y el espermatozoide, así como su rol modulador de la funcionalidad espermática no han sido dilucidados. Objetivos: 1) Evaluar la expresión de SLPI en testículo y espermatozoides humanos, 2) Determinar su capacidad de regular la activación del sistema de la proteasa espermática proacrosina/acrosina. Metodos: Se evaluó la expresión de SLPI en testículo y espermatozoides humanos por RT-PCR (transcripto) y "Western immunoblotting" e inmunocitoquimica (proteína). Se realizaron estudios de co-localización con procrosina/acrosina. Se analizó el efecto de SLPI recombinante (rhSLPI)sobre la activación de proacrosina en extractos ácidos de espermatozoides humanos. Resultados: 1) Se determino la presencia del transcripto de SLPI en testículo y espermatozoides y se detectó una forma proteica con u n peso molecular de ~ 12KDa, similar a la encontrada en el plasma seminal humano, 2) SLPI fue inmunolocalizada en la región acrosomal de espermatozoides no capacitados y capacitados, perdiendose su señal en los reaccionados, 3) SLPI mostró co-localización con el sistema procrosina/acrosina en espermatozoides con el acrosoma intacto, 4) En ensayos in vitro, rhSLPI inhibió la activación de procrosina, de manera tiempo y dosis dependiente. Conclusiones: SLPI se inmunolocaliza en el capuchón acrosomal de los espermatozoides humanos e inhibe la activación de proacrosina, resultados que permiten proponer su rol modulador de la exocitsis acrosomal.
| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | conferenceObject biblioteca |
| Language: | spa |
| Published: |
2013
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| Subjects: | SLPI, Proteína catiónica, Gónada masculina, Plasma seminal humano, |
| Online Access: | http://hdl.handle.net/11086/30078 |
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| Summary: | SLPI (del inglés Secretory Leukocyte Protease Inhibitor) es una proteína catiónica no glicosilada de 11,7KDa con potente actividad inhibidora de proteasas. Su presencia ha sido detectada en tejidos (epidídimo/próstata/vesículas seminales/útero/trompas de Fallopio) y fluidos (plasma seminal/moco cervical) del tracto reproductor. Sin embargo, su expresión en la gónada masculina y el espermatozoide, así como su rol modulador de la funcionalidad espermática no han sido dilucidados. Objetivos: 1) Evaluar la expresión de SLPI en testículo y espermatozoides humanos, 2) Determinar su capacidad de regular la activación del sistema de la proteasa espermática proacrosina/acrosina. Metodos: Se evaluó la expresión de SLPI en testículo y espermatozoides humanos por RT-PCR (transcripto) y "Western immunoblotting" e inmunocitoquimica (proteína). Se realizaron estudios de co-localización con procrosina/acrosina. Se analizó el efecto de SLPI recombinante (rhSLPI)sobre la activación de proacrosina en extractos ácidos de espermatozoides humanos. Resultados: 1) Se determino la presencia del transcripto de SLPI en testículo y espermatozoides y se detectó una forma proteica con u n peso molecular de ~ 12KDa, similar a la encontrada en el plasma seminal humano, 2) SLPI fue inmunolocalizada en la región acrosomal de espermatozoides no capacitados y capacitados, perdiendose su señal en los reaccionados, 3) SLPI mostró co-localización con el sistema procrosina/acrosina en espermatozoides con el acrosoma intacto, 4) En ensayos in vitro, rhSLPI inhibió la activación de procrosina, de manera tiempo y dosis dependiente. Conclusiones: SLPI se inmunolocaliza en el capuchón acrosomal de los espermatozoides humanos e inhibe la activación de proacrosina, resultados que permiten proponer su rol modulador de la exocitsis acrosomal. |
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