Aislamiento de protoplastos del mesofilo del género Coffea

Se describe un método rápido pare el aislamiento de protoplastos a partir de hojas de café, probándose diferentes enzimas en varias combinaciones. Es posible liberar abundante cantidad de protoplastos a partir de hojas jóvenes, provenientes de varias líneas y cruzamientos. de las especies Coffea arabica y C canephora mediante su incubación durante 4 horas en celulasa (3%), pectoliasa (0 5%) y manitol (0 6 motel) a pH 5.8. Los protoplastos se filtraron y lavaron varias veces en agua de mar (85%), y fue necesario resuspenderlos en percoll (70%) debido a su densidad. Los protoplastos sobreviven varias semanas. y regeneran pared celular. En uno de los medios (A 43), después de 2 semanas se observan algunas divisiones. Se están probando varias medios de cultivo con diferentes concentraciones de hormonas.

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Bibliographic Details
Main Authors: Orozco, F.J, Schieder, O.
Format: Artículo biblioteca
Language:English
Published: Instituto Interamericano de Cooperación para la Agricultura (IICA) 1984-10
Subjects:PROTOPLASTOS, HOJAS, CAFÉ, COFFEA, COFFEA ARABICA, COFFEA CANEPHORA, ENZIMAS, FILTRACIÓN, AGUA DE MAR, INVESTIGACIÓN AGRARIA, Sede Central,
Online Access:https://repositorio.catie.ac.cr/handle/11554/11965
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Description
Summary:Se describe un método rápido pare el aislamiento de protoplastos a partir de hojas de café, probándose diferentes enzimas en varias combinaciones. Es posible liberar abundante cantidad de protoplastos a partir de hojas jóvenes, provenientes de varias líneas y cruzamientos. de las especies Coffea arabica y C canephora mediante su incubación durante 4 horas en celulasa (3%), pectoliasa (0 5%) y manitol (0 6 motel) a pH 5.8. Los protoplastos se filtraron y lavaron varias veces en agua de mar (85%), y fue necesario resuspenderlos en percoll (70%) debido a su densidad. Los protoplastos sobreviven varias semanas. y regeneran pared celular. En uno de los medios (A 43), después de 2 semanas se observan algunas divisiones. Se están probando varias medios de cultivo con diferentes concentraciones de hormonas.