Método não destrutivo para isolamento DNA de sementes de milho visando à genotipagem em larga escala.
Resumo - A genotipagem em larga escala a partir de sementes oferece muitas vantagens em um programa de melhoramento, tal como facilitando o uso de marcadores de Àcido Desoxirribonucleico, da sigla em Inglês Deoxyribonucleic Acid (DNA), em um programa de Seleção Assistido por Marcadores (SAM). A extração de DNA a partir de tecido foliar requer a germinação prévia das sementes e consome bastante tempo. A remoção de parte do endosperma para a extração de DNA não compromete e percentagem de germinação ou vigor da semente. Neste trabalho verificou-se a possibilidade de realizar a polymerase chain reaction (PCR), para um gene cópia única, enzima lisina cetoglutarato redutase/sacaropina desidrogenase, da sigla, em inglês, Lysine-ketoglutarate reductase (LKR) a partir de extrato de sementes de milho. O método testado mostrou-se eficiente para a amplificação do gene-alvo a partir do extrato de sementes, possibilitando, posteriormente, a sua aplicação na análise de várias centenas de amostras simultaneamente em um programa de genotipagem via sementes em larga escala.
| Main Authors: | , , |
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| Other Authors: | |
| Format: | Anais e Proceedings de eventos biblioteca |
| Language: | pt_BR por |
| Published: |
2018-12-12
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| Subjects: | Detecção de marcadores, Marker detection, Milho, Polymerase chain reaction, |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1101337 |
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| Summary: | Resumo - A genotipagem em larga escala a partir de sementes oferece muitas vantagens em um programa de melhoramento, tal como facilitando o uso de marcadores de Àcido Desoxirribonucleico, da sigla em Inglês Deoxyribonucleic Acid (DNA), em um programa de Seleção Assistido por Marcadores (SAM). A extração de DNA a partir de tecido foliar requer a germinação prévia das sementes e consome bastante tempo. A remoção de parte do endosperma para a extração de DNA não compromete e percentagem de germinação ou vigor da semente. Neste trabalho verificou-se a possibilidade de realizar a polymerase chain reaction (PCR), para um gene cópia única, enzima lisina cetoglutarato redutase/sacaropina desidrogenase, da sigla, em inglês, Lysine-ketoglutarate reductase (LKR) a partir de extrato de sementes de milho. O método testado mostrou-se eficiente para a amplificação do gene-alvo a partir do extrato de sementes, possibilitando, posteriormente, a sua aplicação na análise de várias centenas de amostras simultaneamente em um programa de genotipagem via sementes em larga escala. |
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