Transformation génétique de protoplastes haploïdes de variétés méditerranéennes de riz (Oryza sativa L.)

Dans le but de transférer aux variétés méditerranéennes de riz, les gènes de Bacillus thuringiensis codant pour les endotoxines à propriétés insecticides, notamment contre la pyrale du riz, il s'est avéré nécessaire de disposer d'une technique efficace de transformation génétique. Une technique de transfert direct de gènes utilisant le polyéthylène-glycol (PEG) a été adaptée aux protoplastes haploïdes des variétés Ariete et Miara. Elle a permis l'obtention de plantes transformées à des fréquences de 0.1 à 3.2 10 -6. Afin d'augmenter la fréquence d'intégration et d'expression des gènes transférés, différents facteurs ont été étudiés. Plusieurs systèmes de sélection des protoplastes transformés ont été comparés : le gène bar conférant une résistance au glufosinate d'ammonium permet d'obtenir les meilleures fréquences de transformation. L'activité de différents promoteurs des gènes à transférer, utilisés actuellement pour la transformation des céréales a été testée. La stratégie de cotransformation utilisant un rapport 2/1 entre le gène rapporteur et le gène marqueur a permis d'obtenir les efficacités de cotransformation les plus élevées, avec des fréquences de coexpression des 2 gènes de 60 %. Après analyse par cytométrie en flux des plantes transgéniques, il est apparu que le traitement au PEG des protoplastes induit une augmentation de leur niveau de ploïdie

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Bibliographic Details
Main Author: Chaïr, Hâna
Format: thesis biblioteca
Language:fre
Published: USTL
Subjects:F30 - Génétique et amélioration des plantes, Oryza sativa, génie génétique, transformation génétique, Électroporation, protoplaste, haploïdie, marqueur génétique, résistance aux organismes nuisibles, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_5438, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_15974, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3220, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_33983, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_13629, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3490, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_24030, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_5731, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3081,
Online Access:http://agritrop.cirad.fr/312799/
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