Purificação de um Potyvirus de ocorrência natural em Hypochaeris brasiliensis.
O gênero Potyvirus é responsável por causar a maior parte das viroses em plantas. Esses vírus têm forma de partículas flexuosas, apresentando de 11 nm a 15 nm de largura e 680 nm a 900 nm de comprimento e constituídos por RNA, fita simples e senso positivo. Hypochaeris brasiliensis é uma planta daninha encontrada na cultura da soja. O objetivo deste trabalho foi a obtenção de uma suspensão viral para a produção de antissoro e o estudo dos componentes estruturais do vírus. Inicialmente, coletou-se 100 g de folhas com sintomas que foram macerados na presença de tampão fosfato de sódio 0,2 M, pH 7. Posteriormente utilizou-se 8,5% de butanol e submeteu-se a centrifugações diferenciais, sendo a primeira ultracentrifugação com colchão de sacarose 20%. A massa molecular da proteína capsidial, foi determinada por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Para cada 100 g de folha, obteve-se 600 µL de suspensão de vírus purificado. A relação de absorbância entre 260 nm e 280 nm foi de 1,38 e as amostras referentes à proteína do capsídeo do vírus apresentaram massa molecular de 34 kDa. O coeficiente de extinção utilizado foi de 2,3, concluindo-se que 100 g de tecido infectado de H. brasiliensis tinha ao final 1 mg de vírus ml-1 . Esse método apresentou uma quantidade satisfatória de suspensão de vírus purificado. Com base na massa molecular da proteína capsidial, e das inclusões citoplasmáticas tipo catavento, concluiu-se que o mesmo pertence ao gênero Potyvirus.
| Main Authors: | , , , , , , |
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| Other Authors: | |
| Format: | Parte de livro biblioteca |
| Language: | pt_BR por |
| Published: |
2015-10-01
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| Subjects: | Soja, RNA., Doença de Planta, Vírus, RNA viruses., Soybeans, Viruses, Plant diseases and disorders, |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1025545 |
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| Summary: | O gênero Potyvirus é responsável por causar a maior parte das viroses em plantas. Esses vírus têm forma de partículas flexuosas, apresentando de 11 nm a 15 nm de largura e 680 nm a 900 nm de comprimento e constituídos por RNA, fita simples e senso positivo. Hypochaeris brasiliensis é uma planta daninha encontrada na cultura da soja. O objetivo deste trabalho foi a obtenção de uma suspensão viral para a produção de antissoro e o estudo dos componentes estruturais do vírus. Inicialmente, coletou-se 100 g de folhas com sintomas que foram macerados na presença de tampão fosfato de sódio 0,2 M, pH 7. Posteriormente utilizou-se 8,5% de butanol e submeteu-se a centrifugações diferenciais, sendo a primeira ultracentrifugação com colchão de sacarose 20%. A massa molecular da proteína capsidial, foi determinada por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Para cada 100 g de folha, obteve-se 600 µL de suspensão de vírus purificado. A relação de absorbância entre 260 nm e 280 nm foi de 1,38 e as amostras referentes à proteína do capsídeo do vírus apresentaram massa molecular de 34 kDa. O coeficiente de extinção utilizado foi de 2,3, concluindo-se que 100 g de tecido infectado de H. brasiliensis tinha ao final 1 mg de vírus ml-1 . Esse método apresentou uma quantidade satisfatória de suspensão de vírus purificado. Com base na massa molecular da proteína capsidial, e das inclusões citoplasmáticas tipo catavento, concluiu-se que o mesmo pertence ao gênero Potyvirus. |
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